1992 Fiscal Year Annual Research Report

トランスジェニック・マウスを用いた遺伝子の組織特異的発現機構の成立に関する研究

Research Project

Project/Area Number	03640536
Research Institution	TOHOKU UNIVERSITY
Principal Investigator	竹内拓司東北大学, 理学部, 教授 (60006426)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山本博章東北大学, 理学部, 助手 (40174809)
Keywords	トランスジェニック・マウス / チロシナーゼ遺伝子 / メラニン / 5'側上流調節領域 / 系統発生
Research Abstract	多細胞生物における形質発現や細胞分化の分子機構を明らかにするためには遺伝子の細胞、組織特異的な発現の調節機構を解析する必要がある。チロシナーゼはメラニン合成の鍵酵素であり、アルビノ突然変異体においてはこの酵素をコードしている遺伝子に欠損がある。チロシナーゼ遺伝子の細胞、組織特異的発現を検討するために、すでにクローン化しているマウスチロシナーゼのcDNAとゲノムのチロシナーゼ遺伝子5'側上流領域とを融合してミニ遺伝子を構築し、アルビノマウスの受精卵に導入したところ、野生型に近い形質をあらわす個体が得られ、この方法が遺伝子の細胞、組織特異的発現の研究目的に適しているという確証を得た。本研究においては系統発生上の細胞、組織特異的遺伝子発現調節機構の成立過程を知るために、種々の脊椎動物のゲノムチロシナーゼ遺伝子から5'側上流領域をクローン化し、マウスチロシナーゼのcDNAと融合したミニ遺伝子を作製し、アルビノマウス受精卵に導入した。先づヒトチロシナーゼ遺伝子の5'側上流領域を用いた場合、その遺伝的背景から期待される野生型の形質をあらわす個体が得られ、その形質が子孫に比較的安定に伝達されるラインが樹立された。そのラインの個体で細胞レベルでの形質発現を検討したところ、メラニン合成という点では、眼の色素上皮、脈絡膜および毛包色素細胞にのみ発現が観察された。しかし、組織化学的ドーパ反応によってチロシナーゼ活性を検出すると、眼、毛包以外に腎臓においてもその発現が見られた。また、RT-PCR法によってチロシナーゼmRNAの存在を検出すると、広範な組織での発現が見られた。このことから、チロシナーゼ遺伝子の発現は転写段階のみでなく、翻訳およびそれ以降の段階においても調節を受けているものと考えられる。現在ウズラ、スッポンの調節領域についても検討中である。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yamamoto,H.: "Phylogeny of regulatory regions of vertebrate tyrosinase gene." Pigment Cell Research. 5. 284-294 (1992)
[Publications] Tanaka,S.: "Expression of tyrosinase gene in the transgenic mice: The heritable patterned coat color." Pigment Cell Research. 5. 300-303 (1992)
[Publications] Tanaka,M.: "Conserved regulatory mechanisms of tyrosinase genes in mice and humans." Pigment Cell Research. 5. 304-311 (1992)
[Publications] Frew,T.: "The expression of mouse tyrosinase in chick cells in vitro and in vivo." Pigment Cell Research. 5. 312-321 (1992)
[Publications] Matsumoto,J.: "Production of transgenic fish carrying mouse tyrosinase gene using an orange-colored stran of medaka (Oryzias latipes)." Pigment Cell Research. 5. 322-327 (1992)
[Publications] Takeuchi,T.: "Expression of tyrosinase gene in transgenic mice: Programmed versus non-programmed expression." J.Invest.Dermatol.100. 1-5 (1993)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

トランスジェニック・マウスを用いた遺伝子の組織特異的発現機構の成立に関する研究

Principal Investigator

竹内 拓司 東北大学, 理学部, 教授 (60006426)

Research Products

[Publications] Yamamoto,H.: "Phylogeny of regulatory regions of vertebrate tyrosinase gene." Pigment Cell Research. 5. 284-294 (1992)

[Publications] Tanaka,S.: "Expression of tyrosinase gene in the transgenic mice: The heritable patterned coat color." Pigment Cell Research. 5. 300-303 (1992)

[Publications] Tanaka,M.: "Conserved regulatory mechanisms of tyrosinase genes in mice and humans." Pigment Cell Research. 5. 304-311 (1992)

[Publications] Frew,T.: "The expression of mouse tyrosinase in chick cells in vitro and in vivo." Pigment Cell Research. 5. 312-321 (1992)

[Publications] Matsumoto,J.: "Production of transgenic fish carrying mouse tyrosinase gene using an orange-colored stran of medaka (Oryzias latipes)." Pigment Cell Research. 5. 322-327 (1992)

[Publications] Takeuchi,T.: "Expression of tyrosinase gene in transgenic mice: Programmed versus non-programmed expression." J.Invest.Dermatol.100. 1-5 (1993)

竹内拓司東北大学, 理学部, 教授 (60006426)