塩生植物に存在する新しいタイプのATPaseの機能と挙動に関する研究

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03660087
• Research Institution: Kinki University
• Principal Investigator: 平山 修 近畿大学, 農学部, 教授 (80032580)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 横田 一成 島根大学, 農学部, 助教授 (90158361)
• Keywords: 塩生植物 / ATPase / phosphatase / ミクロソ-ム / 膜結合型酵素 / 耐塩性酵素

Research Abstract

塩生植物オカヒジキ(Salsola komarovi)をホモゲナイズし,分画遠心によつてミクロソ-ム画分を調製した。ミクロソ-ム画分にzuittergentを加えて(終濃度,0.5%)可溶化し,得られた可溶化タンパク質をDEAEートヨパ-ルカラムによるHPLCで分離し,ATPase活性画分を得た。この活性画分をさらにTSKgelーG3000SWカラムでHPLC分離することにより,精製ATPase画分(膜結合型ATPase)を調製した。他方,100,000×g上清画分を硫安分画し活性画分どして40ー60%飽和硫安画分を集め,これを上記と同様にDEAEートヨパ-ルカラムおよびTSKgelーG3000SWカラムにかけ,遊離型ATPaseを精製した。膜結合型および遊離型ATPaseの存在比は4:96であった。両酵素はともにpーnitrophenylphosphate>pyrophosphate>ADP=ATPの順にリン酸エステルをよく分解した。また,K^+,Na^+,Rb^+,Ca^<2+>,Mg^<2+>の一価二価カチオンで活性が促進された。50mMnitrate,1mM azideの阻害剤で全く影響を受けないが,100μMorthovanadateおよび100μM molybdateの阻害剤で強く阻害された。これらの結果は,既報のデ-タから判断すると,本酵素はATPaseおよびphosphataseの両性質をもっているATPaseであり,acid phosphataseにより近い酵素と云える。本酵素は強い耐塩性を示し,0.8MNaclおよび0.8Mkclの何れの塩にもほとんど活性に影響を受けなかった。強い耐塩性をもつ酵素の報告は,知る限りこれが最初である。本膜結合型ATPaseは,オカヒジキ・ミクロソ-ム画分に存在するphosphatase活性の約90%を占め,中生植物ではみられない特異な酵素分布を示した。

Research Products

• [Publications] 平山 修,横田 一成,野田 政之,本多 哲郎: "塩生植物オカヒジキにおける膜結合性ホスファタ-ゼの存在とその特性" Agricultural and Biological chemistry.