1992 Fiscal Year Annual Research Report
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03660115
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| Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
山下 一郎 広島大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (20144884)
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| Keywords | 減数分裂 / 胞子形成 / 転写調節 / プロティンキナーゼ |
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| Research Abstract |
減数分裂開始を正に調節する遺伝子としてIME2、SME2、およびSME3を単離した。IME2の転写は減数分裂初期に特異的であり、SME2とSME3の転写は栄養増殖期の静止期ですでに蓄積がみられた。SME2はIME1とIME2の転写には影響しないが、減数分裂後期遺伝子(SGA1)の転写を正に調節していること、SME3はIME1の転写を正に調節することが判明した。グルコアミラーゼ遺伝子(STA1)の正の転写調節因子をコードするGAM1およびGAM3遺伝子はIME1の転写活性化にも重要であること、また、SUD1、GAM2、NIM1、およびNIM2はIME2の転写を負に調節していることを明らかにした。以上の結果から、減数分裂開始を支配する正および負の転写調節因子によるカスケードを構築した。
IME2タンパクに特異的な抗体を用い、IME2タンパクが核内に局在すること、およびプロティンキナーゼ活性をもつことを証明した。また、酸性アミノ酸を多く含むカルボキシ末端側のペプチドを欠失したIME2タンパクは、窒素源あるいはグルコースによる胞子形成阻害を部分的に解除することにより、このC末端ペプチドは負の調節機能をもつことが示唆された。
減数分裂後期遺伝子(SGA1)の転写をIME2キナーゼがどのようなメカニズムで調節するのか検討した。SGA1遺伝子の5´上流配列のなかに正(UAS)と負(NRE)の転写調節配列を見出した。UASはIME2によって調節されていないこと、また、NREを欠失することSGA1の転写はIME2な無関係に発現することから、IME2キナーゼはNREを介した負の転写調節を解除することを明らかにした。ゲルシフト法により、UASおよびNREに結合するタンパクを同定した。
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[Publications] H. Kawaguchi: "Nutritional requlation of meiosis-specific gene expression in Saccharomyces cerevisiae" Bioscience, Biotechnoloqy, and Biochemistry. 56. 289-297 (1992)
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[Publications] H. Yoshimoto: "The Saccharomyces cerevisiae GAM2/SIN3 protein plays arole in both activation and repression of transcription" Molecular and General Genetics. 223. 327-330 (1992)
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[Publications] H. Yoshimoto: "Identity of the GAM3 qene with ADR6,each required for transcription of the STA1 or ADH2 gene in Saccharomyces cerevisiae" Bioscience,Biotechnoloqy,and Biochemistry. 56. 527-529 (1992)
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[Publications] 山下 一郎: "清酒酵母の研究-'80年代の研究-" 清酒酵母研究会, 225 (1992)
