1992 Fiscal Year Annual Research Report
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03660217
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| Research Institution | TOHOKU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
村本 光二 東北大学, 農学部, 助教授 (90157800)
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| Keywords | レクチン / 無脊椎動物レクチン / フジツボ / 石灰化 / カルシウム / 殼 / 凝集素 |
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| Research Abstract |
本研究では有殼無脊椎動物の脱皮と殼形成など、石灰化機構におけるレクチンの生理機能を明らかにすることを目的にし、水産甲殼類アカフジツボのマルチプル・レクチンの体内分布と組成変動、炭酸カルシウム結晶化に対するレクチンの阻害作用などを検討し、以下に示す成果を得た。
1.アカフジツボ・レクチンの酵素免疫測定法を設定し、アカフジツボ組織・器官におけるマルチプル・レクチンの分布組成を調べた。レクチン総量の70%以上は体腔液にあり、残りは各組織に分散していた。レクチン組成含量には季節変動がみられた。また、体液の2次元電気泳動と酵素免疫測定法による分析の結果、レクチンは体液タンパク質の主要成分(20-30%)であることが分かった。
2.岩手県と高知県から採取したアカフジツボのレクチンを分析して日本沿岸に分布するアカフジツボには地理的種内遺伝変異が存在することを示した。
3.無脊椎動物の殼を形成するマトリックス成分の糖とアミノ酸分析する方法を検討した。本方法を使い、キタムラサキウニとイトマキヒトデの外殼中にシアロ糖タンパク質を検出し、その糖組成を明らかにした。
4.アカフジツボのマルチプル・レクチン溶液に塩化カルシウムを添加した時に観察される紫外差吸収スペクトルの変化量から、両者間の結合定数を求め、BRA-2とBRA-3は各々、1.4_X10^4M^<-1>と2.2_X10^4M^<-1>であることを示した。
5.炭酸カルシウムの結晶化に対するレクチンの阻害作用を炭酸カルシウム過飽和溶液pHの経時変化によって調べた。アカフジツボ・レクチンはポリ・アスパラギン酸やホスビチンと同程度の阻害作用を示した。化学修飾による検討からレクチンの立体構造が阻害作用に重要であることが明らかになった。
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[Publications] K.Muramoto: "Seasonal changes in the multiple lectin compositions of the acorn barnacle Megabalanus rosa as related to ovarian development." Comp.Biochem.Physiol.98B. 603-607 (1991)
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[Publications] K.Muramoto: "Analysis of sugar compositions of glycoproteins electroblotted onto PVDF membrane." Nippon Suisan Gakkaishi. 57. 1121-1126 (1991)
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[Publications] K.Muramoto: "Photoaffinity labeling of an acorn barnacle lectin with a photoactivatable fluorescent reagent derivative of D-galactosamine." Dev.Comp.Immunol.16. 1-8 (1992)
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[Publications] K.Muramoto: "Analysis of gamma-carboxy-glutamic acid in marine invetebrate shell matrices." Anal.Sci.7 Suppl. 939-940 (1992)
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[Publications] K.Muramoto: "The amino-acid sequence of a lectin from conger eel,Conger myriaster,skin mucus." Biochim.Biophys.Acta. 1116. 129-136 (1992)
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[Publications] K.Muramoto: "Geographical variation of the multiple lectin in the acorn barnacle,Megabalanus rosa." Nippon Suisan Gakkaishi. 58. 1505-1510 (1992)
