1992 Fiscal Year Annual Research Report
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03670027
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| Research Institution | Kyoto prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
岡村 均 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60158813)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田口 淳一 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (50188132)
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| Keywords | aromaticL-aminoacid decarboxylase / ^3H-DOPA / in situ hybridization / オートラジオグラフィー / 視床下部 |
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| Research Abstract |
ラット又は、ヒトのAromatic L-Aminoacid Decarboxylase(AADc)のcomplete seguenceを含むcDNAをNicle-Translationにて^<35>S-ATPで標識し、in situ hybridizationを行ないラット脳におけるAADcmRNAの分布を検索した。ラット中脳及び視床下部にAADc免疫陽性細胞の分布と一致してAADcmRNA陽性細胞を検出した。しかし、現在までのところTHmRNAのin situhybridizationの陽性シグナル量に比し、かなり、シグナル強度が低い。上記は、cDNAプローブでの結果であるが、現在更にシグナルの検出能力を上げるためAADcのcDNAをsubcloneし、それよりRNAプローブを作成している。
また、^3H-DoPA取り込み能を持つ細胞in viroの条件で検索するため、^3H-DoPAの腹腔内注射を、新生仔期ラットで行なった。^3H-DoPAは、^3H-tyrosineから、精製tyrosine hydroxylase酵素純品を用いて、^3H-DoPAを精製したものを、横浜市大医学部薬理、後嶋、三須先生より供与していただいたものを用いた。ラットはresetpine(10mg/kg)Pargyline(40mg/kg)Ro-4-4602(50mg/kg)を前処置し、^3H-DoPA17.25×10^3μci/π又は、3×10^3μci/πを腹腔内投与し、60分後断頭した。クリオスタット切片(15μm)作成後オートラジオグラフィーを行った。^3H-DOPAの放射活性の最も強い部位は被殻尾状核に認められ、つづいて側坐核、嗅結節の順であった。視床下部は予想に反し大脳皮質と同程度の比較的弱い放射活性を示すのみであった。このことは、AADcニューロンが大量に存在する視床下部における^3-H-DOPA取り込み能は、通常の黒質線条体系の終末が存在する被殻尾状態よりも低いことを示している。しかし視床下部全域に中等度の放射活性が認められたことは、血中の^3H-DOPAは血液脳関門を通り、視床下部のニューロンに取り込まれ得ることを示している。
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[Publications] Yamada,K.,Sakai,M.,Okamura,H.,et al.: "Detection of fyrosine hydroxylase and phenylethanolamine-N-methyl transferase messenger RNAS in the mouse adrenal gland and the brain by up situ hybridization." Histochemistry. 97. 201-206 (1992)
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[Publications] Uno,T.,Hisa,Y.,Murakami,Y.,et al.: "Distribution of tyrosine hydroxylase immunoreactine fibers in the canine larynx." Eur.Arch,Otorhinolargngol. 249. 40-43 (1992)
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[Publications] Okamura,H.,Tanaka,M.,et al.: "A simple combined tech nique of histofluorescene and peptide-immunocytochemistry for the analye of the coexistence of monoamines and peptide in brain stem neurons." Biogenic Amines. 9. 195-204 (1992)
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[Publications] Matsumoto,Y.,Okamura,H.,et al.: "Immunocytochemical survey of haloperidol-induced immunoreactive changes of〔Met〕eukephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in the rat forebrain." Brain Res.Bull.28. 683-695 (1992)
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[Publications] Tanaka,M.,Okamura,H.,et al.: "Diffeyential expression of serotonin and 〔Met〕enkephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in neurons of the rat brain stem." Brain Res.Bull.(1993)
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[Publications] Yokoyama,C.,Okamura,H.,et al.: "Resistence of hypothalamic dopaminergic neurons to 6-hydroxydopamine toxicity." Brain Res.Bull.(1992)
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[Publications] 岡村 均: "組織細胞化学" 神経伝達物質レセプターの定量的invitro オートラジオグラフィー日本組織細胞化学編, 154-163 (1992)
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[Publications] 岡村 均: "医学のあゆみ" L-DOPA含有ニューロンの形態学, 823-826 (1992)
