神経成長因子による神経突起伸張誘導の分子機構とMAPキナーゼ

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03670135
• Research Institution: Institute for Developmental Research, Aichi Human Service Center
• Principal Investigator: 佐野 護 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所, 形態学部, 室長 (60090429)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岩永 操 愛知県コロニー研究所, 形態学部, 助手
• Keywords: PC12D細胞 / MAPキナーゼ / 神経突起 / 神経成長因子 / ラッフル / アクチン

Research Abstract

1、PC12D細胞では、NGFのみならず、bFGF、EGFなどの刺激によっても神経突起が誘導された。 これと相関するかたちでMAPキナーゼ活性が誘導される事実より、このキナーゼ活性の神経細胞分化への関与の可能性を考える筆者のこれまでの主張を強化した。 またその内容を論文として発表した。
2、MAPキナーゼのイオン交換カラムクロマトグラフィーを行い、NGF,FGF,EGFやcAMPなどの刺激によってPC12D細胞内のどの様なキナーゼが活性化されるのかについて調べ、更に突起誘導との関連性を調べた。 その結果、NGF,FGF,EGFにより同一のMAPキナーゼが活性化される可能性を生化学的に示唆した。 その内容を論文として発表した。
3、HPLCによる酵素の精製については、他研究室の研究の進展状況も考慮し、断念した。 MAPキナーゼを精製後、抗体を作成するとの計画も、従って中止となったが、ごく最近、MAPキナーゼ抗体の市販品が現われたので、購入し、PC12細胞の神経細胞分化におけるこの酵素の挙動について検討中である。
NGF,cAMP,bFGF,EGFなどをPC12D細胞に数分処理すると、細胞周囲にアクチン染色に陽性のラッフルが形成される現象について観察し、(1)ラッフル形成は、神経突起誘導の初期反応と見られる事、 (2)更にそれが蛋白質燐酸化を介して起こる事実を認め、論文として発表した。

Research Products

• [Publications] Mamoru Sano: "Activation of Microtubule-Associated Protein Kinase in PC12D cells in Response to Both Fibroblast Growth Factor and Epidermal Growth Factor and Concomitant Stemulation of the Outgrowth of Neurites." Journal of Neurochemistry. 58. 837-844 (1992)
• [Publications] Mamoru Sano: "Chromatographic Resolution and CharacterezatioN of a Nerve Growth Factor-dependaut Kinase That Phosphorylates Microtubule-Associatod Protein 1 and 2 in PC12 cells." Journal of Neurochemistry. 59. 1263-1272 (1992)
• [Publications] Mamoru Sano: "Requirement for Specitic Protein Kinase Activities during the Papid Redistribution of F-actin Ahat Precedes the Outgrowth of Neurites in PC12D cells." Cell Structure and Function. 17. 341-350 (1992)