サイトカインを誘導するマウス自己抗体IgG遺伝子の構造解析

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03670167
• Research Institution: 山梨医科大学
• Principal Investigator: 田坂 捷雄 山梨医科大学, 医学部, 助教授 (40093265)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 先浜 俊子 山梨医科大学, 医学部, 助手 (70187061)
• Keywords: サイトカイン / IgG遺伝子 / 自己免疫

Research Abstract

我々はすでに自己免疫モデルマウスのうち、MRL/lpr,gld,lpr^<cg>において血中のIgGをマウス骨髄由来ILー3依存性細胞株FDCーP2/185ー4に加えると、ILー3、ILー6、TNFαなどのサイトカインの産生を誘導ないし増強させることを蛋白レベル、遺伝子レベルで報告してきた。そして、正常マウスIgGをはじめ、NZB、NZB/wF1、BXSBなどの他の自己免疫マウスIgGには、このような作用はみられないため、MRL/lマウス脾細胞を融合して、モノクロ-ナルIgGを作製し、これを材料として、IgG遺伝子の解析を今回試みた。まずハイブリド-マ1G10を大量に培養し、poly(A)^+RNAを精製した。これを鋳型として逆転写酵素によりcDNAを合成し、PCR法にてIgGV領域のcDNAを増巾した。得られたIgGV領域のCDNAをプラスミド、PUC118、PUC119に組み込みdideoxy法によってDNA塩基配列を決定し、現在し鎖は完了した。さらにH鎖においても同様の事を行って解析中である。

Research Products

• [Publications] Tasaka,K et al: "Proliferative activity of autoimmune MRL mouse serum IgG to interleukinー3 dependent cell line through autocrine mechanism" Cellular Immunology. 121. 317-327 (1989)
• [Publications] Sakihama,T et al: "Polyclonal and monoclonal IgGs from MRL/Mpー1pr/1pr mice induce an interleukinー3 dependent cell line to produce interleukinー3 through Fc∂ receptor mediated mechanism" Cellular Immunology. 125. 160-170 (1990)
• [Publications] Iwamoto,M et al: "Serum IgG from an autoimmune prone mouse C3H/Hejーgld/gld supports the interleukinー3 dependent cell line through an autocrine mechanism" Cellular Immunology. 125. 151-159 (1990)
• [Publications] Sakihama,T et al: "Monoclonal IgGs from an autoimmune MRL/Mpー1pr/1pr mouse induce interleukinー3 dependent myeloid cell line to produce tumor necrosis factorα and interleukin 6" Cellular Immunology. 132. 1-9 (1992)
• [Publications] Satoh,E et al: "Serum IgG from CBA/KlJmsー1pr^<cg>/1pr^<cg> mice induce interleukin 3 in an interleukinー3 dependent cell line possible correlation with lymphadenopathy" cellular Immunology. 138. 372-380 (1991)