1991 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト肺小細胞癌における神経細胞接着分子(NーCAM)の発現とその機能
| Project/Area Number |
03670400
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
桝野 富彌 大阪大学, 医学部・第3内科, 講師 (20135677)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
齋藤 伸一 大阪大学, 医学部・第3内科, 医員
川瀬 一郎 大阪大学, 医学部・第3内科, 助手 (10161324)
|
|---|
| Keywords | 肺小細胞癌 / 神経細胞接着分子 |
|---|
| Research Abstract |
肺小細胞癌は神経内分泌系の性質を有し、臨床的悪性度も高い事から注目を集めている。その細胞膜表面上にはクラスタ-1と呼ばれる抗原が豊富に発現しているが、近年神経細胞接着分子(NーCAM)であることが確実となり、特に肺小細胞癌の悪性度、転移といった観点から興味が持たれる。NーCAMは各組識の発生、分化に関連して多様かつ特異的なisoformが存在するため、我々は、本年度まず肺小細胞癌に発現するNーCAM isoformの固定を目的とした。
当研究室で樹立した肺小細胞癌培養株を免疫源としてマウスなG1型単クロ-ン抗体ITKー2及びVー3を作製した。これらの抗体は免疫組織染色、FACS、免疫沈降法、ウエスタン法等の解析により、いずれも、各種肺小細胞癌培養株で145KDaのNーCAM分子を認識している事が判明した。
次に、既に一次構造の判明している筋型NーCAMを参考に5'末端300bpのcDNA proheをRTーPCR法を用いて作製、20種類の肺小細胞癌培養株を中心にサガン、ノザン法による検討を行った。DNAレベルではrearrangement等の異常は認めず、またノザン法ではいずれの培養株も6.2Kbの位置にsingle bandとして検出された。
以上より肺小細胞癌では、NーCAMは6.2kbのmRNA及び145KDaの糖蛋白として発現することを明らかとした。現在ヒトNーCAMとしてはNK細胞、筋細胞、神経芽細胞腫の一次構造が判明しているのみだが、筋型及び神経芽細胞腫については特異的と考えられる配列が認められている。肺小細胞癌にも特異的配列が含まれる可能性があり、診断、治療上の有益性が示唆される。我々は樹立した肺小細胞癌よりcDNA libraryを作製しスクリ-ニングすることによりNーCAM cDNAクロ-ンを単離、現在、全一次構造の解析を行っている。
|
