1992 Fiscal Year Annual Research Report

GRF及びソマトスタチン受容体cDNAクローニングとその末端肥大症腺腫での発現

Research Project

Project/Area Number	03671151
Research Institution	KOBE UNIVERSITY
Principal Investigator	阿部廣己神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20159437)
Keywords	GRF受容体 / ソマトスタチン受容体 / G蛋白共役型受容体 / 末端肥大症 / 下垂体腺腫
Research Abstract	既知のG蛋白共役型受容体、特にサブスタンス Pやドーパミン受容体の膜貫通領域(TMD)からhomologyの高い塩基配列を検索しTMD II,III,V,VIより15merのdegenerate primerを作製した。クロンテック社から購入した末端肥大症下垂体腺腫のcDNAライブラリーと本病院で手術時にえられた末端肥大症下垂体腺腫から作製したcDNAライブラリーからPCR法によりG蛋白共役型受容体の増幅を試みた。後者の場合にはホルモン負荷テストの結果からGRFやソマトスタチンの受容体を発現している腺腫を選んでcDNAライブラリーを作製した。Primerを種々に組み合わせてPCRを行いG蛋白共役型受容体の一部を増幅したところ、約300-500bpのサイズを中心に多数のPCR産物がえられた。また、一部の腺腫では、抽出したPolya-RNAよりRT-PCR法で同時に受容体の一部を増幅した。これらのPCR産物である程度サイズ別に分離した後、Bluescript vectorへsubcloningして、その塩基配列を決定した。二十数個のクローンのsequencingを行ったが、そのうち3個のクローンがその塩基配列から未知のG蛋白共役型受容体の断片である可能性が高かった。次ぎに、このDNA断片をプローブにしてcDNAライブラリーのplaque hybridizationをおこなったところ、5個の陽性plaqueがえられた。これら、plaqueのcDNAの塩基配列を調べたところ、1っのクローンがfull sizeのG蛋白共役型受容体で、データベースでの検索で、リガンドは不明ながらも既にクローニングされているCannabinoid受容体である事が判明した。この受容体が末端肥大症下垂体腺腫に発現している事は興味深く、その意義については今後の検討を要する。残りの4クローンのG蛋白共役型受容体cDNAについては、現在full sizeを解析するためsequencing中である。しかし、残念ながら目的とするソマトスタチン及びGRFの受容体のcDNAのクローニングについては、昨年末にそれぞれ外国の研究施設より報告があった。ただ、末端肥大症の下垂体腺腫には、GRFやソマトスタチン受容体以外にも、GHの分泌や腺腫の増殖に関与する未知の受容体遺伝子の発現が考えられ、今後も、これらcDNAライブラリーを使って、受容体のcDNAクローニングを続けていくつもりである。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] T.Uchiyama: "Negative regulation of hypothalamic growth hormone-releasing factor(GRF)messenger ribonucleic acid(mRNA)by grwoth hormone(GH)and insulin-like growth factor(IGF-I):Effect of passive immunization of GRF and somatostatin and of GH or IGF-I replacement of hypothalamic GRF mRNA levels in male rats." Neuroendocrinology. (1993)
[Publications] S.Ohashi: "Paradoxical GH suppression by secretagogues in Acromegaly?" Horm.Metabol.Res.(1993)
[Publications] S.Hayashi: "Effect of an intravenous administration of growth hormonereleasing peptide(GHRP)on plasma growth hormone in patients with short stature." Clinical Pediatric Endocrinology. (1993)
[Publications] S.Ohashi: "Effect of fasting and/or growth hormone(GH)administration on GH receptor messenger ribonucleic acid(mRNA)and GH-binding protein mRNA levels in rats detected by respective specific probes." Endocrinology. (1993)
[Publications] 阿部廣己: "視床下部-下垂体機能検査そう鬱病と神経内分泌" 学会出版センター, (1993)
[Publications] 阿部廣己: "視床下部ホルモンと消化管最新内科学大系" 中山書店, (1993)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

GRF及びソマトスタチン受容体cDNAクローニングとその末端肥大症腺腫での発現

Principal Investigator

阿部 廣己 神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20159437)

Research Products

[Publications] S.Ohashi: "Paradoxical GH suppression by secretagogues in Acromegaly?" Horm.Metabol.Res.(1993)

[Publications] S.Hayashi: "Effect of an intravenous administration of growth hormonereleasing peptide(GHRP)on plasma growth hormone in patients with short stature." Clinical Pediatric Endocrinology. (1993)

[Publications] S.Ohashi: "Effect of fasting and/or growth hormone(GH)administration on GH receptor messenger ribonucleic acid(mRNA)and GH-binding protein mRNA levels in rats detected by respective specific probes." Endocrinology. (1993)

[Publications] 阿部 廣己: "視床下部-下垂体機能検査 そう鬱病と神経内分泌" 学会出版センター, (1993)

[Publications] 阿部 廣己: "視床下部ホルモンと消化管 最新内科学大系" 中山書店, (1993)

阿部廣己神戸大学, 医学部附属病院, 講師 (20159437)

[Publications] 阿部廣己: "視床下部-下垂体機能検査そう鬱病と神経内分泌" 学会出版センター, (1993)

[Publications] 阿部廣己: "視床下部ホルモンと消化管最新内科学大系" 中山書店, (1993)