1991 Fiscal Year Annual Research Report
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03680225
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| Research Institution | National Institute of Radiological Sciences |
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Principal Investigator |
稲葉 浩子 放射線医学総合研究所, 遺伝研究部, 主任研究官 (70159953)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
島津 良枝 放射線医学総合研究所, 薬理化学研究部, 主任研究官 (10162687)
森明 充興 放射線医学総合研究所, 遺伝研究部, 主任研究官 (00166430)
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| Keywords | 活性酸素 / 活性酸素増産剤 / Mutant / S.cerevisiae / S.pombe / CHO・Kl / DNA repair |
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| Research Abstract |
[1]イ-スト活性酸素感受性および耐性株の分離
(1)S.pombeを突然変異剤で処理後、170,000個のコロニ-から活性酸素消去系を欠損するために活性酸素増産剤に感受性になった株を最終的に約400株、DNA修復系を欠損するために感受性となった株を約50株得た。これらのうちで放射線感受性株は少なくとも10の相補性群に分類できた。また、新しい紫外線感受性株が得られた。これら突然変異株の放射線感受性から、S.pombeの修復系は2つの除去修復系、2つの組換え修復系と1つの複製後修復系からなると推定された。
(2)X線と紫外線に感受性な突然変異株M12を相補するS.pombe遺伝子をクロ-ニングした。この遺伝子はS.cerevisiaeにも存在することが、Southern hybridizationの結果判った。
[2]CHO細胞からの活性酸素防御系欠損突然変異株の分離
(1)CHO.K1を突然変異剤EMSで処理後コロニ-を作らせ、活性酸素増産剤のPlumbagin(PG)含有培地で増殖できないものを約0.1%の頻度で分離した。これらは、PGと他の活性酸素増産剤Methyl viologen(MV)に対する感受性から4グル-プに分類できた。これらの内、両試薬に感受性の高い2つのグル-プの変異株について活性酸素消去系との関連を検討した。
(2)CHO細胞は低濃度のMV前処理でMVに対して耐性となる適性となる適応応答の現象を示すことが示された。
[3]二次元電気泳動法を用いて、放射線で誘導合成される蛋白質を検出した。同じ方法を用いて、活性酸素で誘導合成される蛋白質の検出同定が可能なことが示唆された。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] M.Morimyo,I.Machida,and E.Hongo: "Defence Mechanisms of S.cervisiae Against Against Active Oxygen Toxity" Radiation Reseach Congress Abstracts. 1. 204 (1991)
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[Publications] Y.Shimazu,H.Hama-Inaba,and F.Sawada: "X-Ray-Induced protein Synthesis in Cultured Human Melanoma Cells" Radiation Reseach Congress Abstracts. 1. 221 (1991)
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[Publications] Estuko HONGO,Isamu MACHIDA,and Mitsuoki MORIMYO: "Mutants of S.cervisiae Sensitive to Active Oxygen Toxicity" J.Rad.Res.,. (1992)
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[Publications] I.MACHIDA,H.HAMA-INABA,E.HONGO,T.SAEKI and M.MORIMYO: "Mutants of Fission Yeast.S.pombe Sensitive to X-rays" J.Rad.Res.,. (1992)
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[Publications] Hiroko HAMA-INABA,Yoshie SHIMAZU,Etsuko HONGO,and Mitsuoki MORIMYO: "Isolation and Characterization of plumbagin-Sensitive CHO Cell Mutants" J.Rad.Res.,. (1992)
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[Publications] M.Morimyo,E.Hongo,H.Hama-Inaba,and I.Machida: "Cloning and Characterization of the mvrC Gene of E.coli K-12 which confers Resistance against Methyl Viologen Toxity" Nucleic Acid Res.,.
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[Publications] Morimyo,M.,Machida,I.,Hongo,E.,Saeki,T.,and Hama-Inaba,H.: "RADIATION-SENSITIVE MUTANTS OF FISSION YEAST S.pombe" Japanese J.Genet.,. 66. 769 (1991)
