1993 Fiscal Year Annual Research Report
増殖抑卸性制単クローン抗体の開発とその機序の解析-特にアポトーシスについて-
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03807020
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
高橋 秀史 札幌医科大学, 医学部・病理学第1講座, 助手 (40231394)
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| Keywords | アポトーシス / Tリンパ球細胞株 / Fas / hsp 70 / p34 cdc2 / Rb |
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| Research Abstract |
ヒトT細胞での増殖制御機構を解析するため、主としてTリンパ球細胞株(SUP-T13)を免疫原として、この細胞に増殖抑制をおこす単クローン抗体を作成し、その作用機序を検討した。クローン2D1(IgM)は、SUP-T13,Jurkat,CCRF-CEM,Molt-4,Molt-3のT細胞株にApoptosisを起こすことが判明した。これらのうち、SUP-T13は最も感受性が高く,lng/mlの2D1で増殖抑制が認められ、2-3時間以内に核の断片化やoligonucleosomeのladder patternが観察された。U937,K562,Reh(B cell),DaudiではApoptosisは認めなかった。この表面抗原分子の同定は、困難であったが、アポトーシス刺激を伝える細胞表面抗原であるFas遺伝子を発現させたマウス細胞株と反応し、ヒトFas分子を認識していることが示された。
SUP-T13から、2D1耐性株(LAC2D1R)を分離樹立した。この細胞上には、SUP-T13と同等の2D1抗体反応性が認められ、apoptosisに至るシグナルの欠損が示唆された。しかし、LAC2D1Rは、カルシウムイオノフォアA23187、放射線刺激などのapoptosis刺激に対しては、感受性は不変で、初期のシグナルの欠損であることが示唆された。これらの細胞において、Hsp70,bcl-2,p34cdc2,Retinoblastoma gene productなどの発現は同等であった。以上の結果、ヒト白血病細胞には、抗Fas抗体との反応性に関して、1)細胞表面Fas陽性、アポトーシス感受性、2)細胞表面Fas陽性、アポトーシス耐性、3)細胞表面Fas陰性の3型が存在することが明かとなった。
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[Publications] 高橋秀史 他: "T細胞レセプターを介するアポトーシスの機序" 臨床免疫. 24. 1039-1046 (1992)
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[Publications] S.Takahashi et,al.: "An Antiprolifevafive Monoclonal Antibody,4F9.Reacts withasubset of Humrr CD45 Molecoles." Tumor Research. 24. 37-49 (1992)
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[Publications] T.Nihei,etad: "Protein interaction of Reninoblastoma Gene procluct pRb110 with Mr.73000 Heat shock cognate protein." Cancer Research. 53. 1702-1705 (1993)
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[Publications] T,Nihei et al: "Demonstration of selective protein complexes of p53 with 73kDa heat shock cogmate pvotein,but not with 72kDa heat shock protein in human tumor cells." Cancer Letters.73. 181-189 (1993)
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[Publications] 高橋秀史 他: "T細胞増殖柳制機構としてのアポトーシス" 実験医学増刊. 11. 176-181 (1993)
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[Publications] S.Takahashi: "Establishment of apoptosis-mducing monoclonal antibody 2DI and 2DI-resistant uariants of human T cell lines." Eur.J.Immunol.23. 1935-1941 (1993)
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[Publications] 高橋秀史: "細胞死の生物学" 東京書籍, (1993)
