1991 Fiscal Year Annual Research Report
非特異的脂質移送蛋白質(nsLーTP)の細胞生物学的研究
Project/Area Number |
03833031
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Research Institution | Kansai Medical University |
Principal Investigator |
田代 裕 関西医科大学, 医学部, 教授 (40077558)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 章嗣 関西医科大学, 医学部, 講師 (30174775)
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Keywords | 非特異的脂質移送蛋白質 / スチロ-ル移送蛋白質2 / 60kDa成分 / 遺伝子クロ-ニング法 / ペルオキシソ-ム / 網膜色素上皮細胞 / 肝細胞 / ラット |
Research Abstract |
本年度はnsLーTPおよびnsLーTP(ニスチロ-ル移送蛋白質2)と交又反応を示す60KDa成の一次構造を決定し、またnsLーTPの網膜色素上皮細胞における分布について研究し、次の結果を得た。 1)ラット肝60kDの成分の(末端側にプレnsLーTP(15kDa)の全配列が存在することが明らかとなった。nslーTPと60kDa成分は同一の遺伝子の産物であると思われる。何れにしてもこの研究によりnsLーTPと60kDa成分との関係が解明された。またkDa成のとチオラ-ゼとの間に部分的相同性が見出された。 2)ラット網膜色素上皮細胞におけるnsLーTPの局在を全コロイド法を用い電顕レベルで研究した。nsLーTPは網膜に存在するマイクロペルオキシソ-ムのマトリックス中に多数見出され、しかもアシルCoAオキシダ-ゼと同居することが判明した。おそらく膜細胞外節に多量存在するdocosahexaenoic aeidのβ酸化にペルオキシソ-ムは関与しているものと推定された。 3)60kDaに対する特異抗体を作製し、60kDa成分の肝細胞分布について現在検討を重ねている。現在までに肝細胞ペルオキシソ-ムに存在することは判明しているが、定量的解析はまだ行っていない。
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[Publications] T.Mori,T.Tsukamoto,H,Mori,Y.Tashiro,Y.Fujiki: "Molecular cloning and deduced amino acid sequence of nonspecific lipid trans fer protein(sterol carrier protein 2)of rat liver:A higher molecular mass(60kDa)protein contains the primary seuqence of nonspecific lipid transfer protein as its C-terminal part." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 88. 4338-4342 (1991)
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[Publications] J.Deguchi,A.Yamamoto,Y.Fujiki,M.Uyama,I.Tsukahara,Y.Tashiro.: "Localization of nonspecific lipid transfer protein(nsLTP=sterol carrier protein 2)and acyl-CoA oxidase in peroxisomes of pigment epithelial cells of rat retina." J.Histochem.Cytochem.40. 403-410 (1992)
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[Publications] Y.Tashiro: "Molecular cell biology of nsL-TP(SCP-2)" Protein Nucleic Acid and Enzyme. 36. 544-553 (1991)
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[Publications] A.Yamamoto,H.Otsu,T.Yoshimori,N.Maeda,K.Mikoshiba,Y.Tashiro.: "Stacks of flattened smooth endoplasmic reticulum highly enriched in inositol 1,4,5-trisphosphate(InsP3)receptor in mouse cerebellar Purkinje cells." Cell Struct.Funct.16. 419-432 (1991)
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[Publications] T.Yoshimori,A.Yamamoto,Y.Moriyama,M.Futai,Y.Tashiro.: "Bafilomycin Al,a specific inhibitor of vacuolar-type H^+-ATPase,inhibits acidification and protein degradation in lysosomes of cultured cells." J.Biol.Chem.266. 17707-17712 (1991)
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[Publications] Y.Tashiro & Y.Fujiki: "Localization,biosynthesis and cDNA cloning of nonspecific lipid transfer protein(Sterol carrier ptotein 2)of rat liver with special reference to the cross-reacting 60 KDa protein.(The Post-Translational Modification of Proteins)" Japan Scienti fic Societies Press(Tokyo), 13 (1992)