1992 Fiscal Year Annual Research Report

昆虫(センチニクバエ)の生体防御機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	04102006
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	名取俊二東京大学, 薬学部, 教授 (50012662)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	倉田祥一朗東京大学, 薬学部, 助手 (90221944) 久保健雄東京大学, 薬学部, 講師 (10201469)
Keywords	センチニクバエ / 生体防御 / 個体発生 / プロテアーゼ / 転写因子 / 抗菌性蛋白 / Sarcophagaレクチン / レクチンリセプター
Research Abstract	本年度は交付申請書に記載した4項目の研究を重点的に実施した。その結果以下のような成果を得た。 1.Sarcophagaレクチンリセプターの解析:(1)センチニクバエ胚由来培養細胞NIH-Sape-4の膜分画からSarcophagaレクチンリセプターと考えられる蛋白を単離した。この蛋白は変性下の分子量約10kDaでSarcophagaレクチンと特異的に結合し、その結合はガラクトースの添加で阻害された。(2)このリセプターに対するモノクローナル抗体を作製した。(3)このモノクローナル抗体を用いて成虫原基を染色すると、将来肢や翅の付け根になる分部にこのリセプターが局在することが判明した。これらの事実から、生体防御蛋白として単離されたSarcophagaレクチンが、特異的なリセプターを介して成虫原基の分化に深くかかわっていることが明らかになった。2.蛹体液細胞膜の200kDa蛋白の解析:200kDa蛋白のcDNAを単離しその全一次構造の決定を目指したが、高分子の蛋白で生化学的な操作段階での回収が思わしくなく、現在まだ完成していない。200kDa蛋白をBrCNで切断し、断片のアミノ酸配列を決定している段階である。3.蛹体液細胞の持つプロテアーゼの解析:これは蛹の時期に非自己化した脂肪体を破壊するプロテアーゼで、蛹体液細胞から電子量29kDaのシステインプロテアーゼの同定と精製に成功した。このプロテアーゼはユニークな基質特異性を示し、精製酵素標品は単独で脂肪体を崩壊させることが示された。またこの酵素のcDNAのクローニングに成功し全一次構造の決定が完了した。ホモロジー検索の結果、この酵素は高等動物のカテプシンβと相同性が高いことが分かった。 4.Sarcophagaレクチン遺伝子の転写因子:Sarcophagaレクチン遺伝子の転写開始部位の上流に、NFκB結合配列と類似した配列が存在することを見出した。また、この配列に特異的に結合する転写因子と思われる蛋白を前述のNIH-Sape-4細胞の核画分から精製した。

Research Products
(14 results)

All Other

All Publications (14 results)

[Publications] Kayoko Tanji: "Induction by psychotropic drugs and local anesthetics of Dnak and GroEL proteins in Escherichia coli" Biochim.Biophys.Acta. 1129. 172-176 (1992)
[Publications] Takahito Jomori: "Function of the lipopolysaccharide-binding protein of periplaneta americana as an opsonin" FEBS Letts.296. 283-286 (1992)
[Publications] Shoichiro Kurata: "Purification of a 29-kDa hemocyte proteinase of Sarcophaga peregrina" Eur.J.Biochem.204. 911-914 (1992)
[Publications] Hiroto Komano: "Evidence for an increase in positive surface charge and an increase in susceptibility to trypsin of Sarcophaga lectin on its interaction with galactose,a hapten sugar of the lectin" Biochem.J.284. 227-230 (1992)
[Publications] Toshiyuki Nakanishi: "Purification,gene cloning,and gene disruption of the transcription elongation factor S-II in Saccaromyces cerevisiae" J.Biol.Chem.267. 13200-13204 (1992)
[Publications] Tohru Mizushima: "Inhibition of Escherichia coli DNA topoisomerase I activity by phospholipids" Biochem.J.285. 503-506 (1992)
[Publications] Shoichiro Kurata: "The 29-kDa hemocyte proteinase dissociates fat body at metamorphosis of Sarcophaga" Develop.Biol.153. 115-121 (1992)
[Publications] Mami Ishikawa: "Purification and characterization of a diptericin homologue from Sarcophaga peregrina (flesh fly)" Biochem.J.287. 573-578 (1992)
[Publications] Aya Nomura: "Purification and localization of p10,a novel protein that increases in nymphal regenerating legs of Periplaneta americana (American cockroach)" Int.J.Dev.Biol.36. 391-398 (1992)
[Publications] Hiroshi Hirai: "Reversal by phosphatidylglycerol and cardiolipin of inhibition of transcription and replication by histones in vitro" Arch.Bichem.Biophys.298. 458-463 (1992)
[Publications] Ko-ichi Homma: "The fate of the prosegment in the acute-phase and programmed synthesis of sapecin,an antibacterial peptide of the flesh fly(Sarcophaga peregrina)" Biochem.J.288. 281-284 (1992)
[Publications] Hiromi Saito: "Purification an characterization of a hemocyte proteinase of Sarcophaga,possibly participating in elimination of foreign substances" Eur.J.Biochem.209. 939-944 (1992)
[Publications] 名取俊二: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 14 (1992)
[Publications] 中島由紀: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 13 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

昆虫(センチニクバエ)の生体防御機構に関する研究

Principal Investigator

名取 俊二 東京大学, 薬学部, 教授 (50012662)

Research Products

[Publications] Kayoko Tanji: "Induction by psychotropic drugs and local anesthetics of Dnak and GroEL proteins in Escherichia coli" Biochim.Biophys.Acta. 1129. 172-176 (1992)

[Publications] Takahito Jomori: "Function of the lipopolysaccharide-binding protein of periplaneta americana as an opsonin" FEBS Letts.296. 283-286 (1992)

[Publications] Shoichiro Kurata: "Purification of a 29-kDa hemocyte proteinase of Sarcophaga peregrina" Eur.J.Biochem.204. 911-914 (1992)

[Publications] Hiroto Komano: "Evidence for an increase in positive surface charge and an increase in susceptibility to trypsin of Sarcophaga lectin on its interaction with galactose,a hapten sugar of the lectin" Biochem.J.284. 227-230 (1992)

[Publications] Toshiyuki Nakanishi: "Purification,gene cloning,and gene disruption of the transcription elongation factor S-II in Saccaromyces cerevisiae" J.Biol.Chem.267. 13200-13204 (1992)

[Publications] Tohru Mizushima: "Inhibition of Escherichia coli DNA topoisomerase I activity by phospholipids" Biochem.J.285. 503-506 (1992)

[Publications] Shoichiro Kurata: "The 29-kDa hemocyte proteinase dissociates fat body at metamorphosis of Sarcophaga" Develop.Biol.153. 115-121 (1992)

[Publications] Mami Ishikawa: "Purification and characterization of a diptericin homologue from Sarcophaga peregrina (flesh fly)" Biochem.J.287. 573-578 (1992)

[Publications] Aya Nomura: "Purification and localization of p10,a novel protein that increases in nymphal regenerating legs of Periplaneta americana (American cockroach)" Int.J.Dev.Biol.36. 391-398 (1992)

[Publications] Hiroshi Hirai: "Reversal by phosphatidylglycerol and cardiolipin of inhibition of transcription and replication by histones in vitro" Arch.Bichem.Biophys.298. 458-463 (1992)

[Publications] Ko-ichi Homma: "The fate of the prosegment in the acute-phase and programmed synthesis of sapecin,an antibacterial peptide of the flesh fly(Sarcophaga peregrina)" Biochem.J.288. 281-284 (1992)

[Publications] Hiromi Saito: "Purification an characterization of a hemocyte proteinase of Sarcophaga,possibly participating in elimination of foreign substances" Eur.J.Biochem.209. 939-944 (1992)

[Publications] 名取 俊二: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 14 (1992)

[Publications] 中島 由紀: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 13 (1992)

名取俊二東京大学, 薬学部, 教授 (50012662)

[Publications] 名取俊二: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 14 (1992)

[Publications] 中島由紀: "無脊椎動物の生体防御" 学会出版センター, 13 (1992)