1992 Fiscal Year Annual Research Report
血球系細胞特異時に発現するSrc型チロシンキナ-ゼLynと細胞の癌化
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04152026
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
山梨 裕司 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40202387)
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| Keywords | チロシンキナーゼ / Src / Lyn / トランスジェニックマウス / レトロウイルス / 血球系細胞 |
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| Research Abstract |
1)ウイルスによるlyn cDNAの導入
昨年度に本研究により作製した野生型、活性化型Lynを発現するレトロウイルスをマウスの骨髄由来細胞に感染させ、in vitro培養系での増殖能の解析を試みた。マ-カ-であるneo耐性を獲得した4種のクロ-ンに対しLynの発現を検討したところ、導入したcDNAにコ-ドされるp56^<lyn>ではなく52kdの蛋白質が抗Lyn単クローン抗体により検出された。現在この現象を理解すべく感染実験を重ねている。
2)lyn cDNAトランスジェニックマウスの作製
昨年度の本研究により得られた野生型及び活性化型lynトランスジーン陽性マウスに対してヒトp56^<lyn>の発現を検討した。過去に免疫グロプリンプロモーター、SV40エンハンサーにより制御されるトランスジーンが、脾臓、肺に高発現されたことから、両臓器におけるヒトp56^<lyn>の量を抗ヒトLyn単クローン抗体を用いた免疫沈降、試験管内自己リン酸化法により検討した。その結果、野生型lynの19系統中17系統に、また活性化型lynの23系統中6系統に各々再現性の良いヒトp56^<lyn>の発現が観察された。このうち、野生型、活性化型高発現系統として各々2系統を選びマウスLynの発現を検討したところ、すべて非トランスジェニックマウスと同程度であった。このことは、前逆のp56^<lyn>が高発現したマウスLynを誤って検出したものでないことを示している。現在、この高発現系統マウスに対して、戻し交配によりトランスジーンをホモに持つ系統を検索している。
3)HTLV-I産生T細胞中でのLynの機能
本年度の研究では報告すべき成果を得ることができなかった。
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[Publications] Yuji Yamanashi: "Activation of Src-like protein-tyrosine kinase Lyn and its association with phoshatidylinositol-3 kinase upon B cell antigen receptor-mediated signaling." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.89. 1118-1122 (1992)
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[Publications] Jun-ichiro Mizuguchi: "Tyrosine protein kinase is involved in anti-IgM-mediated signaling in Bal17 B lymphoma cells." J.Immunol.148. 689-694 (1992)
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[Publications] Fumiaki Uchiumi: "Characterization of the promoter region of the src family gene lyn and its trans activation by human T-cell leukemia virus type I-encoded p40tax." Molec.Cell.Biol.12. 3784-3795 (1992)
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[Publications] Yuji Yamanashi: "Identification of HS1 protein as a major substrate of protein-tyrosine kinase(s) upon B cell antigen receptor-mediated signaling." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.(1993)
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[Publications] Tadashi Yamamoto: "Association of Src-family kinase Lyn with B-cell antigen receptor" Immunol.Rev.(1993)
