1992 Fiscal Year Annual Research Report
変異クラスII分子発現による抗腫瘍T細胞免疫応答の誘導
Project/Area Number |
04152093
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Research Institution | 佐賀医科大学 |
Principal Investigator |
木本 雅夫 佐賀医科大学, 医学部 (40153225)
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Keywords | クラスII分子 / アロ抗原刺激能 / 変異株 |
Research Abstract |
M12.C3細胞にA<k/β>/A<k/α>分子を発現させたトランスフェクタント及び,そのクラスII分子変異株を得て,これらを刺激細胞としたMLRを行なった.その結果,A_β59番目のGlu-Asp置換による変異でアロ抗原刺激能が強く亢進することが明らかになった.A_β64番目のGln-Pro,Glu-Arg,A_β70番目のArg-Gln置換では親株と変化がなかった.さらに多種類の機能的変異株を得るために以下の様な実験を行なった.M12.C3リンフォーマ細胞にA<z/β>遺伝子(pCEXVA<z/β>)を遺伝子導入し,トランスフェクタントTA<z/β>を作成した.導入したA<z/β>遺伝子の発現(M12.C3の内因性のA<d/α>と会合してA<z/β>/A<d/α>クラスII分子を形成)を2次元電気泳動解析,フローサイトメトリー解析にて確認した.また,このA<z/β>/A<d/α>分子に反応するT細胞クローンをB/WF1マウスから作成した.突然変異誘導体(EMS)を用いてTA<z/β>トランスフェクタント細胞から変異細胞株を作成した.そのトランスフェクタント細胞の抗原提供能力およびクラスII分子の発現を,T細胞クローンおよびモノクローナル抗体を用いて解析した.その結果,(1)クラスII分子発現のない細胞,(2)クラスII分子発現は正常であるがT細胞刺激能のない細胞,(3)クラスII分子発現は正常であるが,T細胞刺激能が亢進している細胞等の変異株が得られた.これらの細胞のクラスII分子の変異部位とその塩基配列ならびに自己およびアロT細胞に対する刺激能を検討中である.
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[Publications] Takashima,H.: "Characterization of T cell tolerance to hepatitis B virus(HBV)antigen in transgenic mice." Immunolgy. 75. 398-405 (1992)
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[Publications] Muraguchi,A.: "Expression of the CD2 molecule on human B lymphoid progenitors." Int.Immunol.4. 841-850 (1992)
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[Publications] Miyake,K.: "Requirement of VLA-4 and VLA-5 integrins for lymphoma cell binding to and migration beneath stromal cells in culture." J.Cell Biol.119. 653-662 (1992)
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[Publications] Ichigi,Y.: "Generation of cells with morphological and antigenic properties of microglia from cloned EBV-transformed lymphoid progenitor cells derived from human fetal liver." Cell.Immunol.(1993)
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[Publications] Gotho,Y.: "Mixed haplotype Abz/Aad class II molecule in(NZB X NZW)F1 mice detected by T cell clones." J.Immunol.(1993)
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[Publications] Matsuo,T.: "Crosslinking of B cell-receptor relates MB-1 molecule nduces signal transmission through throsine kinase pathway in early B lineage cells." J.Immunol.(1993)
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[Publications] 内藤 恵子: "クラスIMHC分子への抗原ペプチドの会合" 臨床免疫. 24. 1468-1475 (1992)
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[Publications] 後藤 祐大: "細胞工学ハンドブック Tリンパ球の抗原刺激による株化" 羊土社, 6 (1992)
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[Publications] 木本 雅夫: "現代免疫学 クローン化T細胞" 医学書院, 8 (1992)