1992 Fiscal Year Annual Research Report

染色体ドメインの機能構造

Research Project

Project/Area Number	04251101
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	水野重樹東北大学, 農学部, 教授 (90112903)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	筒井研岡山大学, 医学部, 助教授 (70108158) 米田悦啓大阪大学, 細胞生体工学センター, 教授 (80191667) 広瀬進国立遺伝研, 形質遺伝, 教授 (90022730) 舛本寛名古屋大学, 理学部, 助手 (70229384) 吉川寛大阪大学, 医学部, 教授 (70019876)
Keywords	湾曲DNA / ヘテロクロマチン / DNA結合タンパク質 / 自己複製配列(ARS) / DNA超らせん化因子 / 核骨格タンパク質 / 核内移行 / セントロメア抗原タンパク質
Research Abstract	12名の班員で標記課題の研究を行ったが、そのうちの主要な成果を以下に記す。水野はニワトリW染色体DNAの約65%を占めるXhoIおよびEcoRIファミリー反復配列がいずれもソレノイド構造をとる高度湾曲DNAであること、核内で最も顕著なヘテロクロマチンボデイーの構成成分であること、細胞周期において著しい後期複製を示すことを明らかにし、さらに、MSB1細胞の核からWヘテロクロマチンを部分的に濃縮する方法を確立し、この画分中にXhoIファミリー配列に高親和結合する数種の非ヒストンタンパク質成合が含まれることを示した。吉川は出芽酵母第VI染色体上の9個の自己複製配列(ARS)の位置決定を行い、さらにこれらの配列の構造を調べ、コア配列、エンハンサーエレメントの存在様式が多様であることを明らかにした。また、これらのうち、ARS606が染色体の強い複製開始点として機能していることを証明した。舛本はヒトのセントロメア抗原タンパク質CENP-BをHeLa細胞の核から製制し、N末から125アミノ酸残基までに4つのαヘリックス形成部位が存在し、これらの領域がDNA結合活性に必須であること、C末側411〜599アミノ酸残基の領域にCENP-Bの2量体形成に必須の配列が含まれることを示した。広瀬はショウジョウバエのDNA超らせん化因子のcDNAクローンを解析し、原核生物のDNAジャイレースAサブユニットの一部やカルシウム結合領域と相同性の高い配列を含むことを示した。米田は精製した熱ショックタンパク質hsc70に対する抗体を作製し、核タンパク質とともに培養細胞の細胞質ヘインジェクションすると核タンパク質の核内移行が阻害されることなどの実験結果からhsc70が核内移行に重要な役割を果たすことを示した。筒井は核骨格に含まれるDNA結合タンパク質p120のcDNA配列を決定した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Y.Saitoh: "Distribution of XhoI and EcoRI family repetitive DNA sequences into separate domains in the chicken W chromosome" Chromosoma. 101. 474-477 (1992)
[Publications] K.Yoda: "A human centromere protein,CENP-B,has a DNA binding domain containing four potential α helices at the NH_2 terminus,which is separable from dimerizing activity" J.Cell Biol.119. 1413-1427 (1992)
[Publications] R.Ohba: "DNA supercoiling facilitates the assembly of transcriptionally active chromatin on the adenovirus major late promoter" Biochem.Biophys.Res.Commun.186. 963-969 (1992)
[Publications] Y.Yoneda: "A long synthetic peptide containing a nuclear localization signal and its flanking sequences of SV40 T-antigen directs the transport of IgM into the nucleus efficiently" Exp.Cell Res.201. 313-320 (1992)
[Publications] N.Imamoto: "Antibodies against 70-kD heat shock cognate protein inhibit mediated nuclear import of karyophilic proteins" J.Cell Biol.119. 1047-1061 (1992)
[Publications] S.Seki: "cDNA cloning,sequencing,expression and possible domain structure of human APEX nuclease homologous to Escherichia coli exonuclease III" Biochim.Biophys.Acta. 1131. 287-299 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

染色体ドメインの機能構造

Principal Investigator

水野 重樹 東北大学, 農学部, 教授 (90112903)

Research Products

[Publications] Y.Saitoh: "Distribution of XhoI and EcoRI family repetitive DNA sequences into separate domains in the chicken W chromosome" Chromosoma. 101. 474-477 (1992)

[Publications] K.Yoda: "A human centromere protein,CENP-B,has a DNA binding domain containing four potential α helices at the NH_2 terminus,which is separable from dimerizing activity" J.Cell Biol.119. 1413-1427 (1992)

[Publications] R.Ohba: "DNA supercoiling facilitates the assembly of transcriptionally active chromatin on the adenovirus major late promoter" Biochem.Biophys.Res.Commun.186. 963-969 (1992)

[Publications] Y.Yoneda: "A long synthetic peptide containing a nuclear localization signal and its flanking sequences of SV40 T-antigen directs the transport of IgM into the nucleus efficiently" Exp.Cell Res.201. 313-320 (1992)

[Publications] N.Imamoto: "Antibodies against 70-kD heat shock cognate protein inhibit mediated nuclear import of karyophilic proteins" J.Cell Biol.119. 1047-1061 (1992)

[Publications] S.Seki: "cDNA cloning,sequencing,expression and possible domain structure of human APEX nuclease homologous to Escherichia coli exonuclease III" Biochim.Biophys.Acta. 1131. 287-299 (1992)

水野重樹東北大学, 農学部, 教授 (90112903)