1992 Fiscal Year Annual Research Report

Saccharomyces酵母を用いたペルオキシソームタンパク選別輸送の解析

Research Project

Project/Area Number	04259213
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	田中渥夫京都大学, 工学部, 教授 (80026088)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	植田充美京都大学, 工学部, 助教授 (90183201)
Keywords	Saccharomyces酵母 / Candida tropicalis / ペルオキシソーム / イソクエン酸リアーゼ / 輸送シグナル / 選別輸送 / 膜透過 / 局在化機構
Research Abstract	我々はアルカン生育Cardida酵母の細胞内にペルオキシソーム(Ps)が多数発達することを世界で初めて発見し,栄養源である炭素化合物を変えることで,この発達を自在にコントロールできることを明らかにしてきた。このPs局在酵素をコードする遺伝子を単離し解析したところ,酵母のPaタンパクの輸送シグナルとして,最近一部のPs酵素の輸送シグナルであろうと推定されているC末のSKL配列とは異なったいくつかのグループが存在することが予測された。Psへの輸送にいくつかのpathwayや関与するいくつかの因子が考えられることから,より扱い易い系の採用が望まれるが,我々はPsの誘導発達条件の選択が難しかったSaccharomyces酵母でPaの誘導発達条件をすでに見い出した。そこで,この取り扱い易い酵母を用いてCandida酵母のPsタンパクの選択輸送の分子レベルでの解析系,いわゆるPs膜透過輸送のmachinery系を解析する系を確立することを目的とした。本年度得た成果は次のような点である。 1.Saccharomyces酵母内の高発現タンパクのコドン選択がCandida酵母のPsタンパンのそれと同じであることから,Candida酵母のPsタンパクをコードする遺伝子(ここでは,イソクエン酸リアーゼ(ICL)を発現させたところ,細胞質可溶タンパクの30%を越える高発現がみられるとともに,Saccharomyces酵母内に発達させたPs内にこのICLタンパクを取り込まることに成功した。これにより,Paの発達の研究に最適のCandida酵母の系を遺伝子解析の容急なSaccharomycesの系とをin vivoでもin vitroでも相互に乗り入れて扱うことができ,今後の研究の大いなる進展の基盤ができた。 2.ICLのC末AKVを欠損させた改変ICLタンパクを用いて選別輸送実験を行ったところ,改変タンパクもPsを選別認識することがわかったが,分解を受けやすいところからC末の立体構造への寄与が示唆された。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Tatsuo Kurihara: "Peroxisomal acetoacetyl-CoA thiolase of an n-alkene-utilizing yeast,Candida tropicalis" European Journl of Biochemistry. 210. 999-1005 (1992)
[Publications] Tatsuo Kurihara: "β-Oxidation of butyrate,the short chain-length fatty acid,occurs in Peroxisomes in the yeast,Candida rtopicalis" Journal of Biochemistry. 111. 783-787 (1992)
[Publications] Tatsuo Kurihara: "Physiological roles of acetoacetyl-CoA theolase in n-alkane-utilizable yeast,Candida tropicalis-Possible contribution to alkene degradation and sterol biosynthesis" Journal of Biochemistry. 112. 845-848 (1992)
[Publications] Yasushi Kamada: "Localization of Candida tropicalis peroxusomal isocitrate lyase highly expressed in peroxisome-proliferated Saccharoyces cerevisiae" Journal of Fermentation and Bioengineering. 74. 368-371 (1992)
[Publications] Naome Kamasawa: "Immunoelectron microscopec localization of thiolases,β-oxidation enzymes of an n-alkane-utilizable yeast,Candida tropicalis" Cell Structure and Function. 17. 203-207 (1992)
[Publications] Atsuo Tanaka: "Assimilation of alkanes by yeasts-functions and biogenesis of peroxisomes" Mycological Research.
[Publications] 田中渥夫: "微生物の機能開発-バイオ研究丸最前線-" 学会出版センター, 330 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

Saccharomyces酵母を用いたペルオキシソームタンパク選別輸送の解析

Principal Investigator

田中 渥夫 京都大学, 工学部, 教授 (80026088)

Research Products

[Publications] Tatsuo Kurihara: "Peroxisomal acetoacetyl-CoA thiolase of an n-alkene-utilizing yeast,Candida tropicalis" European Journl of Biochemistry. 210. 999-1005 (1992)

[Publications] Tatsuo Kurihara: "β-Oxidation of butyrate,the short chain-length fatty acid,occurs in Peroxisomes in the yeast,Candida rtopicalis" Journal of Biochemistry. 111. 783-787 (1992)

[Publications] Tatsuo Kurihara: "Physiological roles of acetoacetyl-CoA theolase in n-alkane-utilizable yeast,Candida tropicalis-Possible contribution to alkene degradation and sterol biosynthesis" Journal of Biochemistry. 112. 845-848 (1992)

[Publications] Yasushi Kamada: "Localization of Candida tropicalis peroxusomal isocitrate lyase highly expressed in peroxisome-proliferated Saccharoyces cerevisiae" Journal of Fermentation and Bioengineering. 74. 368-371 (1992)

[Publications] Naome Kamasawa: "Immunoelectron microscopec localization of thiolases,β-oxidation enzymes of an n-alkane-utilizable yeast,Candida tropicalis" Cell Structure and Function. 17. 203-207 (1992)

[Publications] Atsuo Tanaka: "Assimilation of alkanes by yeasts-functions and biogenesis of peroxisomes" Mycological Research.

[Publications] 田中 渥夫: "微生物の機能開発-バイオ研究丸最前線-" 学会出版センター, 330 (1992)

田中渥夫京都大学, 工学部, 教授 (80026088)

[Publications] 田中渥夫: "微生物の機能開発-バイオ研究丸最前線-" 学会出版センター, 330 (1992)