1992 Fiscal Year Annual Research Report

インスリンレセプター遺伝子異常と糖尿病

Research Project

Project/Area Number	04260217
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	蛯名洋介徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (00112227)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	林日出喜徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (10218589) 村上尚徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (40210009)
Keywords	インスリンセプター異常 / 糖尿病
Research Abstract	インスリンレセプター遺伝子異常が、インスリン非依存性(成人型)糖尿病の遺伝因子の一つとして考えられるとの立場から、この型の糖尿病患者の中にどれほどの頻度でその異常が存在するのかを検索する。典型的なインスリン非依存性糖尿病患者(NIDDM)約100人の血液(10ml)より染色体DNAを分離し、ヒトインスリンレセプター遺伝子22個の全エクソンをPCR法にて増幅(まずサンプル約50名分について行なう)し、βサブユニットのDNA塩基配列決定を終了し、αサブユニットはエクソン1と3を除いて終了している。現在のところβサブユニットの同一部位にアミノ酸置換が疑われる症例が3例見られ、また他の部位にアミノ酸置換の見られる症例が1例いる。このようにインスリンレセプター遺伝子には変異の起きやすいHot Spotが存在することが予想された。またアミノ酸配列の変化を伴うものに対してcDNA上で同じ変異を作製し、その変異レセプターをチャイニーズハムスターの細胞表面上に人工的に発現させたクローンを確立し、その細胞を用いインスリン作用の検討する。今後αサブユニットの残りのエクソンも解析し、アミノ酸変異がレセプター機能の低下を伴うものに対し、DNAプローブを非アイソトープ的にラベルしたものを用い遺伝子簡易診断法を確立する予定である。ヒトインスリンレセプターcDNAのβサブユニットチロシンキナーゼドメインのATP結合部位であるリジンをメチニオンに変え、チロシンキナーゼ活性のないレセプターをコードするcDNAをトランスジェニックマウスの方法によりマウス卵細胞に導入し、異常レセプター遺伝子を発現しうるマウスを得た。ヘテロマウスの場合は現在までのところ糖尿病になっていないが、ホモマウスについても検討中である。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y.ct al.: "The α-type 85-KDa subunit of phosphatidylinositol 3-Kinase is phosphorylated at tyrosines 368,580, and 607 by the insulin receptor" J.Biol.Chem. in press.
[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y.ct al.: "Insulin treatmcnt stimulates the tyrosine phosphorylation of the α-type 85-KDa subunit of phosphatidylinositol 3-Kinase in vivo." J.Biol.Chem.267. 22575-22580 (1992)
[Publications] Murakami,T.,Ebina Y. et al.: "Identification of two enhancer elements in the gene encoding the type 1 goucose transporter from the mouse which are responsive to serum, growth factor, and oncogenes." J.Biol.Chem.267. 9300-9306 (1992)
[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y. et al.: "Phosphorylation in vitro of the 85kDa subunit of phosphatidylinositol 3-kinase and its possible activation by insulin receptor tyrosine kinase." Biochem.J.280. 769-775 (1991)
[Publications] Araki,E.,Ebina Y. et al.: "A cluster of four Spl binding sites required for efficient experssion of the human insulin receptor gene." J.Biol.Chem.266. 3944-3948 (1991)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

インスリンレセプター遺伝子異常と糖尿病

Principal Investigator

蛯名 洋介 徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (00112227)

Research Products

[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y.ct al.: "The α-type 85-KDa subunit of phosphatidylinositol 3-Kinase is phosphorylated at tyrosines 368,580, and 607 by the insulin receptor" J.Biol.Chem. in press.

[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y.ct al.: "Insulin treatmcnt stimulates the tyrosine phosphorylation of the α-type 85-KDa subunit of phosphatidylinositol 3-Kinase in vivo." J.Biol.Chem.267. 22575-22580 (1992)

[Publications] Murakami,T.,Ebina Y. et al.: "Identification of two enhancer elements in the gene encoding the type 1 goucose transporter from the mouse which are responsive to serum, growth factor, and oncogenes." J.Biol.Chem.267. 9300-9306 (1992)

[Publications] Hayashi,H.,Ebina Y. et al.: "Phosphorylation in vitro of the 85kDa subunit of phosphatidylinositol 3-kinase and its possible activation by insulin receptor tyrosine kinase." Biochem.J.280. 769-775 (1991)

[Publications] Araki,E.,Ebina Y. et al.: "A cluster of four Spl binding sites required for efficient experssion of the human insulin receptor gene." J.Biol.Chem.266. 3944-3948 (1991)

蛯名洋介徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (00112227)