1992 Fiscal Year Annual Research Report

β-ヘキソースアミニダーゼαサブユニット異常症の遺伝子解析とペプチド構造解析

Research Project

Project/Area Number	04260223
Research Institution	Osaka City University
Principal Investigator	田中あけみ大阪市立大学, 医学部, 助手 (30145776)
Keywords	Tay-Sachs病 / β-ヘキソースアミニダーゼαサブユニット / 遺伝子解析 / 変異酵素蛋白 / スプライシイグ変異 / 乾燥瀘紙血スクリーニング
Research Abstract	[目的]前年度において、Tay-Sachs病の患者24例のβ-ヘキソースアミニダーゼ、αサブユニット遺伝子の解析を行い、患者の対立遺伝子の80%にも及ぶ変異を見つけた。これは、イントロン5の3′末端のGがTに置換されたものであった。今年度は、この変異遺伝子により作られるαサブユニット蛋白の性質を調べるとともに、乾燥瀘紙血を用いて日本人集団におけるこの変異遺伝子の頻度を調べた。さらに、他の遺伝子変異についても検索した。[方法](1)Northern blot法により、変異遺伝子から産生されるmRNAの大きさと量を調べた。(2)DEAE-セルロースカラムでヘキソースアミニダーゼのAとRを分け、変異酵素蛋白の性質を調べた。(3)COS細胞に変異c-DNAを導入して、発現実験を行った。(4)乾燥瀘紙血よりDNAを抽出し、allele specific oligonucleotide hybrdization法により変異遺伝子の有無を調べた。(5)その他の変異対立遺伝子については、PCRでαサブユニットのc-DNAを増幅し塩基配列を求めた。 [結果](1)イントロン5の3′末端の一塩基置換によりエクソン6が完全に欠失するスプライシングの異常を来していた。mRNAは、正常の長さより短く、正常の量の約3/4であった。その他の異常なスプライシングは、起こっていなかった。(2)ヘキソースミニダーゼをDEAE-セルロースカラムでAとBとに分けた各々について、4-MU-GlcNAcと4-MU-GlcNAc-6SO_4とのそれぞれの基質で活性を測定したところ、変異αサブユニット蛋白は、βサブユニットと結合はできるが、酵素活性は持ち得ないと推測された。(3)遺伝子発現実験でも、変異酵素蛋白は、活性を示さなかった。(4)乾燥瀘紙血を用いたスクリーニングから、保因者頻度は1/137.6人、患者頻度は1/59.631人と計算された。(5)その他の変異対立遺伝子は10個で、うち1つは別のスプライジング変異、5つはmissese mutation4つはmRNAを産生しないものであった。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 石井正光,田中あけみ: "先天性代謝異常症-生化学的、電顕的診断-" 皮膚. 34. 39-44 (1992)
[Publications] 田中あけみ: "Tay-Sachs病" 臨床医.
[Publications] M.Rosario dos Santos,Akemi Tanaka,M.Clara sa Miranda,et.al: "GM_2-gangliosidosis B_1 variant:Analysis of β-hexosaminidase α gene mutation in 11 patients from a defined region in Portugal." American Journal of Human Genetics. 49. 886-890 (1991)
[Publications] Horst Kima,Akemi Tanaka,Doris Schnabel,et al.: "Characterization of full-length CDNAs and the gene coding for the human GM_2 activator protein." FEBS Letter. 289. 260-264 (1991)
[Publications] Junji Nishimoto,Akemi Tanaka,Eiji Nanba,et al.: "Expression of the β-hexosaminidase α subunit gene with the for-base insertion of infantile Jewish Tay-Sachs disease." Journal of Biological Chemistry. 266. 14306-14309 (1991)
[Publications] Rose-Mary Boustany,Akemi Tamaka,Junji Nishimoto,et al.: "Genetic cause of a juvenile from of Tay-Sachs disease in a Lebanese child." Annals of Neurology. 29. 104-107 (1991)
[Publications] 田中あけみ(分担執筆): "今日の治療指針" 医学書院, 1 (1991)
[Publications] 田中あけみ(分担執筆): "新生化学実験講座" 東京化学同人, 2 (1991)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

β-ヘキソースアミニダーゼαサブユニット異常症の遺伝子解析とペプチド構造解析

Principal Investigator

田中 あけみ 大阪市立大学, 医学部, 助手 (30145776)

Research Products

[Publications] 石井 正光,田中 あけみ: "先天性代謝異常症-生化学的、電顕的診断-" 皮膚. 34. 39-44 (1992)

[Publications] 田中 あけみ: "Tay-Sachs病" 臨床医.

[Publications] M.Rosario dos Santos,Akemi Tanaka,M.Clara sa Miranda,et.al: "GM_2-gangliosidosis B_1 variant:Analysis of β-hexosaminidase α gene mutation in 11 patients from a defined region in Portugal." American Journal of Human Genetics. 49. 886-890 (1991)

[Publications] Horst Kima,Akemi Tanaka,Doris Schnabel,et al.: "Characterization of full-length CDNAs and the gene coding for the human GM_2 activator protein." FEBS Letter. 289. 260-264 (1991)

[Publications] Junji Nishimoto,Akemi Tanaka,Eiji Nanba,et al.: "Expression of the β-hexosaminidase α subunit gene with the for-base insertion of infantile Jewish Tay-Sachs disease." Journal of Biological Chemistry. 266. 14306-14309 (1991)

[Publications] Rose-Mary Boustany,Akemi Tamaka,Junji Nishimoto,et al.: "Genetic cause of a juvenile from of Tay-Sachs disease in a Lebanese child." Annals of Neurology. 29. 104-107 (1991)

[Publications] 田中 あけみ(分担執筆): "今日の治療指針" 医学書院, 1 (1991)

[Publications] 田中 あけみ(分担執筆): "新生化学実験講座" 東京化学同人, 2 (1991)

田中あけみ大阪市立大学, 医学部, 助手 (30145776)

[Publications] 石井正光,田中あけみ: "先天性代謝異常症-生化学的、電顕的診断-" 皮膚. 34. 39-44 (1992)

[Publications] 田中あけみ: "Tay-Sachs病" 臨床医.

[Publications] 田中あけみ(分担執筆): "今日の治療指針" 医学書院, 1 (1991)

[Publications] 田中あけみ(分担執筆): "新生化学実験講座" 東京化学同人, 2 (1991)