1992 Fiscal Year Annual Research Report

タンパク質工学による食品タンパク質の機能設計

Research Project

Project/Area Number	04265206
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	熊谷泉東京大学, 工学部 (10161689)
Keywords	タンパク質工学 / 機能性食品 / リゾチーム / α-ラクトアルブミン / モノクローナル抗体 / 放線菌 / 放線菌スブチリシンインヒビター
Research Abstract	[研究目的]平成4年度は機能性食品の素材の中で食品関連タンパク質の微生物における安全性の高いタンパク質生産系の開発・整備を目的とした。 [研究経過と成果] 酵母の分泌発現系既に、ニワトリ卵白リゾチーム(HEL)及び、乳中のヤギ-α-ラクトアルブミン(α-LA)前駆体をコードするcDNAを利用し、酵母における分泌発現系を確立してきた。これらの発現系を利用してそれぞれ十数種類のアミノ酸置換体を作製して機能解析を行っている。更に、安定な高発現系の開発を目指して、酵母のrRNA遺伝子の一部をクローニングしてこの遺伝子断片を利用してHEL及びα-LAのcDNAの染色体中への組み込みを目指した。放線菌の分泌発現系既に放線菌スブチリシンインヒビター(SSI)の放線菌での大量分泌発現系を確立してきた。本年度はニワトリオボムコイドの第3ドメイン(OVA)及び、ニワトリ卵白リゾチーム(HEL)を抗原とするモノクローナル抗体HyHEL10の可変領域断片(Fv)の遺伝子を化学合成し、このSSIの発現系を利用し両タンパク質の分泌発現系を確立した。また、発現タンパク質は、充分な生物活性を有していることを明らかにした。抗体可変領域断片の分泌発現系は放線菌における抗体生産の最初の例である。以上のように、本年度の研究成果として安全性の高いと考えられる酵母及び、放線菌におけるタンパク質発現系を食品関連タンパク質に適用し、これらの生産系の応用性の広さを示すことができた。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Izumi Kumagai: "Redesign of the substrare-binding site of hen egg-white lysozyme based on the molecular evolution of c-type lysozymes" Journal of Biological Chemistry. 267. 4608-4612 (1992)
[Publications] Izumi Kumagai: "Functional conversion of the homologous proteins, α-lactalbumin and lysozyme by exon exchange" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 89. 5887-5891 (1992)
[Publications] Akira Kato: "Structural and functional properties of hen egg-white lysozyme deaminated by protein engineering" Biosci.Biotech.Biochem.56. 1424-1428 (1992)
[Publications] Izumi Kumagai: "Effects of subsite alterations on substrate-binding mode in the active site of hen egg-white lysozyme" European Journal of Biochemistry. (1993)
[Publications] Shuichi Kojima: "Requirement of conformational rigidity around the reactive site of protease inhibitor for its inhibitory action" Journal of Molecular Biology. (1993)
[Publications] Yoshitaka Ueda: "Synthesis and expression of the DNA encoding the Fv domain of anti-lusozyme monoclomal antibody,HyHEL10 in Streptomyces lividans" Gene. (1993)
[Publications] 熊谷泉: "酵素機能実現をめざしたα-ラクトアルブミンの蛋白質工学 ″蛋白質・核酸・酵素・臨時増刊″37巻 pp371-380" 共立出版, 10 (1992)
[Publications] 熊谷泉: "蛋白質の構造と機能の改変ー総説 Marnen Advanced Technolosy ″蛋白質工学″" 丸善, 17 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

タンパク質工学による食品タンパク質の機能設計

Principal Investigator

熊谷 泉 東京大学, 工学部 (10161689)

Research Products

[Publications] Izumi Kumagai: "Redesign of the substrare-binding site of hen egg-white lysozyme based on the molecular evolution of c-type lysozymes" Journal of Biological Chemistry. 267. 4608-4612 (1992)

[Publications] Izumi Kumagai: "Functional conversion of the homologous proteins, α-lactalbumin and lysozyme by exon exchange" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 89. 5887-5891 (1992)

[Publications] Akira Kato: "Structural and functional properties of hen egg-white lysozyme deaminated by protein engineering" Biosci.Biotech.Biochem.56. 1424-1428 (1992)

[Publications] Izumi Kumagai: "Effects of subsite alterations on substrate-binding mode in the active site of hen egg-white lysozyme" European Journal of Biochemistry. (1993)

[Publications] Shuichi Kojima: "Requirement of conformational rigidity around the reactive site of protease inhibitor for its inhibitory action" Journal of Molecular Biology. (1993)

[Publications] Yoshitaka Ueda: "Synthesis and expression of the DNA encoding the Fv domain of anti-lusozyme monoclomal antibody,HyHEL10 in Streptomyces lividans" Gene. (1993)

[Publications] 熊谷 泉: "酵素機能実現をめざしたα-ラクトアルブミンの蛋白質工学 ″蛋白質・核酸・酵素・臨時増刊″37巻 pp371-380" 共立出版, 10 (1992)

[Publications] 熊谷 泉: "蛋白質の構造と機能の改変ー総説 Marnen Advanced Technolosy ″蛋白質工学″" 丸善, 17 (1992)

熊谷泉東京大学, 工学部 (10161689)

[Publications] 熊谷泉: "酵素機能実現をめざしたα-ラクトアルブミンの蛋白質工学 ″蛋白質・核酸・酵素・臨時増刊″37巻 pp371-380" 共立出版, 10 (1992)

[Publications] 熊谷泉: "蛋白質の構造と機能の改変ー総説 Marnen Advanced Technolosy ″蛋白質工学″" 丸善, 17 (1992)