1993 Fiscal Year Annual Research Report

液胞型ATP分解酵素の細胞機能

Research Project

Project/Area Number	04266103
Research Institution	Tokyo Institute of Technology
Principal Investigator	吉田賢右東京工業大学, 資源化学研究所, 教授 (90049073)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	柿沼喜己千葉大学, 薬学部, 助手 (80134394) 前田正知大阪大学, 産業科学研究所, 助教授 (80190297) 田代裕関西医科大学, 医学部, 教授 (40077558) 向畑恭男名古屋大学, 理学部, 教授 (10028110) 安楽泰宏東京大学, 理学部, 教授 (20012643)
Keywords	液胞型ATPase / 液胞 / プロテインスプライシング / 貧食 / Na^+輸送 / 好塩菌 / 好熱菌 / 液胞型ATPaseのオペロン
Research Abstract	まず,真核細胞の液胞型ATPaseについて述べる.網膜色素上皮細胞における視細胞外節の貧食は,貧食胞の形成,リソソームとの融合,融合したファゴリソソームにおける分解の3つのステップより成るが,液胞型ATPaseの阻害剤であるバフィロマイシンはその最後のステップだけを阻害することが明らかになった.また液胞型ATPaseが抗ガン剤タウノマイシンの細胞外排出過程に関係していることも明らかになった.酵母の液胞型ATPaseについては,そのαサブユニットが自触媒的にプロテインスプライシングを受けて成熟することが明らかになり,そのメカニズムが提案された.また,液胞型ATPaseの分子集合および活性発現に必須の2種種の遺伝子が新たに同定された.原核生物の液胞型ATPaseについては連鎖球菌Na^+輸送性ATPaseのオペロン全長の塩基配列が決定された.11の遺伝子から成り,3つが疎水性,8つが親水性蛋白質であり,真核生物の液胞型ATPaseのサブユニットとよく対応することが明らかとなった.好塩菌,好熱菌の液胞型ATPaseの全遺伝子の決定も順調に進行中である.好熱菌の液胞型ATPaseについては,蛋白質としても精製標品が得られるようになり,8種類のサブユニットから成り,輸送するイオンはNa^+ではなくH^+であることが判明した.好塩菌の液胞型ATPaseについては,種々の細菌種について検討した結果,それぞれ活性に必要とされる塩の種類などに相当の変化があり,バラエティに富んだものであることが判明した.

Research Products
(17 results)

All Other

All Publications (17 results)

[Publications] Ishii,N.: "Three Dimensional Structure of F_1-ATPase of Thermophilic Bacterium PS3 Obtained from Electron Crytallography" J.Biochem.113. 245-250 (1993)
[Publications] Kaibara,C.: "AT(D)PMg-induced dissociation of the α_3β_3 complex of the F_1-ATPase from a thermophilic Bacillus PS3 into α_1β_1 heterodimers・・・" FEBS Letter. 321. 46-50 (1993)
[Publications] Tozawa,K.: "Structure of the α subunit of F_1-ATPase probed by limited Proteolysis" J.Biol.Chem.268. 19044-19054 (1993)
[Publications] Muneyuki,E.: "Inhibitory effect of NaN_3 on the F_0F_1 ATPase of submitochondrial particles as related to nucleotide binding" Biochim.Biophys.Acta. 1144. 62-68 (1993)
[Publications] Odaka,M.: "In vivo affinity label of a protein expressed in Escerichia coli;Coenzyme A occupied the AT(D)P binding site of the mutant F_1-ATPase・・・" FEBS Letter. 336. 231-235 (1993)
[Publications] Anraku,Y.: "Protozyme:Emerging Evidence in Nature" J.Biochem.115. 175-178 (1994)
[Publications] Ho,M.N.: "VMA13 Encodes a 54-kDa Vacuolar II^+-ATPase SubunitRequired for Activity but not Assembly of the Enzyme Complex in Saccharomyces・・・" J.Biol.Chem.268. 18286-18292 (1993)
[Publications] Hirata,R.: "VMA12 is Essential for Assembly of the Vacuolar H^+-ATPase Subunits onto the Vacuolar Membrane in Saccharomyces cerevisiae" J.Biol.Chem.268. 961-967 (1993)
[Publications] Henomatsu,N.: "Inhibition of intracellular transport of newly synthesized prolactin by bafilomycin A_1 in a pituitary tumor cell line,CH_3 cells" Eur.J.Cell Biol.62. 127-139 (1993)
[Publications] Manabe,T.: "Inhibitors of vacuolar-type H^+-ATPase suppresses proliferation of cultured cells" J.Cell Physiol.157. 445-452 (1993)
[Publications] Tamura,S.: "Gastric DNA-binding proteins recognize upstream sequence motifs of parietal cell-specific genes" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90. 10876-10880 (1993)
[Publications] Maeda,M.: "Gastric proton pump(H^+/K^+-ATPase):Structure and gene regulation through GATA DNA-binding protein(s)" J.Biochem.115. 6-14 (1994)
[Publications] Takase,K.: "Cloning and sequencing of the genes coding for the A and B subunits of vacuolar-type Na^+-ATPase from Enterococcus hirae" J.Biol.Chem.268. 11610-11616 (1993)
[Publications] Kakinuma,Y.: "A gene encoding the 16-kDa.proteolipid subunit of Enterococcus hirae Na^+-ATPase complex" Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 1063-1069 (1993)
[Publications] 柿沼喜己: "連鎖球菌Na^+輸送性ATPaseの構造と機能" 薬学研究の進歩(薬学研究奨励財団). 9. 55-67 (1993)
[Publications] 吉森保: "小胞輸送と選別の分子機構蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)
[Publications] 森山芳則: "細胞機能研究のための低分子プローブ(別府輝彦ら編)分担課題:液胞型H^+-ATPase阻害剤としてのバフィロマイシンおよび類縁化合物蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

液胞型ATP分解酵素の細胞機能

Principal Investigator

吉田 賢右 東京工業大学, 資源化学研究所, 教授 (90049073)

Research Products

[Publications] Ishii,N.: "Three Dimensional Structure of F_1-ATPase of Thermophilic Bacterium PS3 Obtained from Electron Crytallography" J.Biochem.113. 245-250 (1993)

[Publications] Kaibara,C.: "AT(D)PMg-induced dissociation of the α_3β_3 complex of the F_1-ATPase from a thermophilic Bacillus PS3 into α_1β_1 heterodimers・・・" FEBS Letter. 321. 46-50 (1993)

[Publications] Tozawa,K.: "Structure of the α subunit of F_1-ATPase probed by limited Proteolysis" J.Biol.Chem.268. 19044-19054 (1993)

[Publications] Muneyuki,E.: "Inhibitory effect of NaN_3 on the F_0F_1 ATPase of submitochondrial particles as related to nucleotide binding" Biochim.Biophys.Acta. 1144. 62-68 (1993)

[Publications] Odaka,M.: "In vivo affinity label of a protein expressed in Escerichia coli;Coenzyme A occupied the AT(D)P binding site of the mutant F_1-ATPase・・・" FEBS Letter. 336. 231-235 (1993)

[Publications] Anraku,Y.: "Protozyme:Emerging Evidence in Nature" J.Biochem.115. 175-178 (1994)

[Publications] Ho,M.N.: "VMA13 Encodes a 54-kDa Vacuolar II^+-ATPase SubunitRequired for Activity but not Assembly of the Enzyme Complex in Saccharomyces・・・" J.Biol.Chem.268. 18286-18292 (1993)

[Publications] Hirata,R.: "VMA12 is Essential for Assembly of the Vacuolar H^+-ATPase Subunits onto the Vacuolar Membrane in Saccharomyces cerevisiae" J.Biol.Chem.268. 961-967 (1993)

[Publications] Henomatsu,N.: "Inhibition of intracellular transport of newly synthesized prolactin by bafilomycin A_1 in a pituitary tumor cell line,CH_3 cells" Eur.J.Cell Biol.62. 127-139 (1993)

[Publications] Manabe,T.: "Inhibitors of vacuolar-type H^+-ATPase suppresses proliferation of cultured cells" J.Cell Physiol.157. 445-452 (1993)

[Publications] Tamura,S.: "Gastric DNA-binding proteins recognize upstream sequence motifs of parietal cell-specific genes" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90. 10876-10880 (1993)

[Publications] Maeda,M.: "Gastric proton pump(H^+/K^+-ATPase):Structure and gene regulation through GATA DNA-binding protein(s)" J.Biochem.115. 6-14 (1994)

[Publications] Takase,K.: "Cloning and sequencing of the genes coding for the A and B subunits of vacuolar-type Na^+-ATPase from Enterococcus hirae" J.Biol.Chem.268. 11610-11616 (1993)

[Publications] Kakinuma,Y.: "A gene encoding the 16-kDa.proteolipid subunit of Enterococcus hirae Na^+-ATPase complex" Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 1063-1069 (1993)

[Publications] 柿沼喜己: "連鎖球菌Na^+輸送性ATPaseの構造と機能" 薬学研究の進歩(薬学研究奨励財団). 9. 55-67 (1993)

[Publications] 吉森保: "小胞輸送と選別の分子機構 蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)

[Publications] 森山芳則: "細胞機能研究のための低分子プローブ(別府輝彦ら編)分担課題:液胞型H^+-ATPase阻害剤としてのバフィロマイシンおよび類縁化合物 蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)

吉田賢右東京工業大学, 資源化学研究所, 教授 (90049073)

[Publications] 吉森保: "小胞輸送と選別の分子機構蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)

[Publications] 森山芳則: "細胞機能研究のための低分子プローブ(別府輝彦ら編)分担課題:液胞型H^+-ATPase阻害剤としてのバフィロマイシンおよび類縁化合物蛋白質・核酸・酵素" 共立出版, 12 (1993)