多発性腎嚢胞の発生とその癌化に関する研究

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04304043
• Research Institution: Faculty of Medicine, University of the Ryukyus
• Principal Investigator: 大澤 炯 琉球大学, 医学部泌尿器科, 教授 (70045251)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 井上 正康 大阪市立大学医学部第一生化, 教授 (80040278) ; 武居 洋 琉球大学, 医学部第二生化, 教授 (70039501) ; 斉藤 泰 長崎大学, 医学部泌尿器科, 教授 (70039832) ; 小磯 謙吉 筑波大学, 臨床医学系泌尿器科, 教授 (20010192) ; 川邉 香月 東京大学, 医学部泌尿器科, 教授 (20124670)
• Keywords: 上皮成長因子(EGF) / デイフェニールアミン(DPA) / N・エチール-N-ハイドロオキシエチールニトロサミン(EHEN) / IL-6 / 線維芽細胞増殖因子(FGF) / 多嚢胞化萎縮腎(ACDK) / MDCK

Research Abstract

(A)病態生化学、分子生物学的研究-(1)ラットにDPA(多発性腎嚢胞を誘発)とEHEN(腫瘍性病変を誘発)を投与し、腫瘍性病変と尿細管の拡張を組織学的に証明した。同時に同腎組織よりAGPC法によって全RNAを抽出し、がん遺伝子c-mycの発現変化をNorthern blot法で検討した。EHENとDPAの併用投与群において,EHENを初期に投与することで、腎c-myc発現の増加が認められた。(2)イヌ腎上皮細胞由来のMDCK細胞をコラーゲン内で培養して嚢胞形成モデルを確立した。嚢胞形成促進因子としてEGF、HGF、インスリン様増殖因子-1、ヒト腎嚢胞液などが同定された。後者の活性は熱、酸。パパイン処理に不安定で前3者とは異なると考えられた。(3)ヒト嚢胞壁細胞において、HGF,C-metの発現がみられ、嚢胞形成に関与することが明らかになった。(4)長時間作用型SODと腎指向性塩基性SODを開発した。特に後者は投与後すみやかに近位尿細管の刷子縁膜表面のプロテオグリカンに結合し、ついで細胞内に取り込まれることを確認した。腎の組織中活性酸素の消去により、シスプラチン腎症を有効に阻止軽減することが可能であった。(5)Flow cytometryによる核DNA量測定により得られたヒストグラム、細胞周期解析、PCNA標識率により,ACDK合併腎細胞癌は悪性度が低かった。(6)ACDKの嚢胞および腎癌の由来する近位尿細管細胞に特異的に存在するWTL抗原のアミノ酸配列の一部を明らかにした。
(B)免疫学的研究-(1)透析開始後3年以内では患者の免疫能の低下が見られ、10年以上の透析では改善した。透析後から患者血清IL-6の上昇する症例が見られた。患者末梢血単核細胞よりmRNAを分離し、RT-PCR法でcDNAを得、PCR反応後、内部コントロールGAPDHの増加との比較でmRNAを定量する方法で、透析によりIL-6 mRNAの増加がみられた。(3)腎癌を伴う嚢胞内液でIL-6とFGFの活性の上昇を示す例が見い出された。
(C)臨床的研究-(1)腎嚢胞を伴う腎癌症例223例の検討より、ACDKに合併する腎癌の特徴を明らかにした。(2)同症例に対し第2次アンケート調査を行い、216例の予後が明らかになった。5年生存率は84.2%と良好であった。予後にかかわる因子はTNM分類、症状の有無、透析の有無などであった。(3)腎移植により、多発性腎嚢胞が縮小することを明らかにした。

Research Products

• [Publications] Horie,S.,Kawabe,K.and et al.: "Mediation of renal cyst formation by hepatocyte growth factor" The Lancet. 344. 789-791 (1994)
• [Publications] 堀江重郎、阿曽佳郎: "先天性尿路疾患の遺伝子解析" 泌尿器外科. 6. 483-488 (1993)
• [Publications] 堀井重郎、東原英二: "嚢胞性腎疾患の診断と治療" Annual Review腎臓. 214-220 (1994)
• [Publications] 宮永直人他: "多発性腎嚢胞の発生における細胞増殖の検討" 日本癌学会総会記事. 81- (1994)
• [Publications] Taide,M., et al: "A study of growth factors in human renal cysts with or without renal cell carcinoma" Clinica Chinmica Acta. 217. 199-203 (1993)
• [Publications] 斉藤 泰: "腎の嚢胞性疾患と透析" 腎と透析. 36. 1091-1092 (1994)
• [Publications] Hayakawa,M.and et al.: "Treatment of Advanced Renal Cell Carcinoma Using Reional Arterial Administration of Lymphokine-Activated Killer Cells in Combination with Low Doses of rI1-2" Urologia Internationalis. 53. 117-124 (1994)
• [Publications] 小川由英他: "嚢胞腎の病態と予後" 泌尿器外科. 7. 1037-1042 (1994)
• [Publications] 小川由英他: "嚢胞の治療" 腎と透析. 38. 251-255 (1995)
• [Publications] Inoue,M.: "The pathogenesis of black liver in mutant(TR-)rats with conjugated・hyperbilirubinemi" Hepatology. 15. 1154-1159 (1993)
• [Publications] Inoue,M.: "Superoxide dismutase with prolonged in vivo half life inhibits intravascular hemolysis and renal injury in burned rats." Am.J.Emergency Med.11. 355-359 (1993)
• [Publications] Inoue,M.: "Albumin binding superoxide dismutase with a prologed half-life reduces reperfusion brain injury." Am.J.Physiol.264. H1708-1716 (1993)
• [Publications] Inoue,M.: "Determination of Superoxide and Ascorbyl Radicals in the Circulation of Animals under Oxidative Stress." Arch.Biochem.Biophys.309No2. 323-328 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "Mechanism for hypersensitvity to endotoxin in P.acnes-sensitized rats." Arch.Biochem.Biophys.312. 135-141 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "Dynamic aspects of glutathione metabolism in obstructive jaundice." J.Gastroenterol.29. 588-592 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "The effect of an SOD derivative administration in a burned rat." Tohoku J.Exp.Med.174. 31-40 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "Effect of adrenomedulin on hepatic pericytes(stellate cells)of the rat." FEBS Lett.356. 109-113 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "Nucleotide receptors on hepatic stellate cells of the.rat." FEBS Lett.354. 53-56 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "Methods in Enzymology,vol.234" Academic Press,New york, 711 (1994)
• [Publications] Inoue,M.: "The Liver:Biology and Pathobiology" Raven Press,New york, 1628 (1994)