1993 Fiscal Year Annual Research Report

酵素機能の改変とペプチド合成および光学分割への応用

Research Project

Project/Area Number	04453093
Research Institution	University of Tsukuba
Principal Investigator	木瀬秀夫筑波大学, 物質工学系, 助教授 (20013170)
Keywords	プロテアーゼ / ペプチド合成 / エステル合成 / アミノ酸 / 有機溶媒 / 光学分割 / 蛍光スペクトル
Research Abstract	水-有機溶媒混合系での酵素活性の発現とその合成化学的応用を目的として研究を行い,次のような成果を得た。 1。プロテアーゼによるペプチド合成における特異性 α-キモトリプシン,スブチリシン等のセリンプロテアーゼを触媒とするペプチド合成において,有機溶媒の性質及び水含有率により酵素の基質特異性ばかりでなく立体特異性が大きく変化する事を見いだした。この現象を利用して,D体アミノ酸を含むペプチド合成が可能である事を立証した。 2。水-有機溶媒系での光学分割今年度は主に安価な工業用酵素であるアルカラーゼを用いて,アミノ酸エステルの分割を行い,溶媒の性質との関係を調べた。その結果,高濃度の有機溶媒中で,酵素の立体特異性がきわめて高い事を見いだし,非天然型アミノ酸を含む各種アミノ酸の簡便な光学分割法を確立した。 3。蛍光分光法による酵素構造の変化の検出昨年度,α-キモトリプシンについて,広範囲の溶媒組成に対してその蛍光波長と触媒活性に相関関係を見いだした。今年度は2種類のスブチリシンに対して同様の研究を行い,やはり蛍光波長と活性の間に高い相関がある事を確認した。これらの結果を,酵素内外の極性の差と酵素構造の変化に関連して考察した。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Y.Tomiuchi,K.Kijima,H.Kise: "Fluorescence Spectroscopic Study of α-Chymotrypsin as Relevant Catalytic Activity in Aqueous-Organic Media" Bull.Chem.Soc.Jpn.66. 1176-1181 (1993)
[Publications] Y.Yamamoto,H.Kise: "Catalysis of Enzyme Aggregates in Organic Solvents.An Attempt at Evaluation of Intrinsic Activity of Proteases in Ethanol" Biotechnol.Lett.15. 647-652 (1993)
[Publications] H.Kise,T.Nagashima: "Enantiospecificity of α-Chymotrypsin at S_1' Site for Peptide Synthesis in Aqueous-Organic Media" Bull.Chem.Soc.Jpn.66. 3693-3698 (1993)
[Publications] T.Itozawa,H.Kise: "Highly Efficient Coenzyme Regeneration System for Reduction of Cyclohexanone by HLADH in Organic Solvents" Biotechnol.Lett.15. 843-846 (1993)
[Publications] Y.Yamamoto,H.Kise: "Unusual Enhancement of Protease Activity in Organic Solvents by Amines" Chem.Lett.1993. 1821-1824 (1993)
[Publications] T.Kijima,K.Ohshima,H.Kise: "Facile Optical Resolution of Amino Acid Esters via Hydrolysis by an Industrial Enzyme in Organic Solvents" J.Chem.Technol.Biotechnol.59. 61-65 (1994)
[Publications] H.Kise(T.Tsuruta et al.ed.): "New Functionality Materials:Design,Preparation,and Control" Elsevier Science Publishers, 398 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

酵素機能の改変とペプチド合成および光学分割への応用

Principal Investigator

木瀬 秀夫 筑波大学, 物質工学系, 助教授 (20013170)

Research Products

[Publications] Y.Tomiuchi,K.Kijima,H.Kise: "Fluorescence Spectroscopic Study of α-Chymotrypsin as Relevant Catalytic Activity in Aqueous-Organic Media" Bull.Chem.Soc.Jpn.66. 1176-1181 (1993)

[Publications] Y.Yamamoto,H.Kise: "Catalysis of Enzyme Aggregates in Organic Solvents.An Attempt at Evaluation of Intrinsic Activity of Proteases in Ethanol" Biotechnol.Lett.15. 647-652 (1993)

[Publications] H.Kise,T.Nagashima: "Enantiospecificity of α-Chymotrypsin at S_1' Site for Peptide Synthesis in Aqueous-Organic Media" Bull.Chem.Soc.Jpn.66. 3693-3698 (1993)

[Publications] T.Itozawa,H.Kise: "Highly Efficient Coenzyme Regeneration System for Reduction of Cyclohexanone by HLADH in Organic Solvents" Biotechnol.Lett.15. 843-846 (1993)

[Publications] Y.Yamamoto,H.Kise: "Unusual Enhancement of Protease Activity in Organic Solvents by Amines" Chem.Lett.1993. 1821-1824 (1993)

[Publications] T.Kijima,K.Ohshima,H.Kise: "Facile Optical Resolution of Amino Acid Esters via Hydrolysis by an Industrial Enzyme in Organic Solvents" J.Chem.Technol.Biotechnol.59. 61-65 (1994)

[Publications] H.Kise(T.Tsuruta et al.ed.): "New Functionality Materials:Design,Preparation,and Control" Elsevier Science Publishers, 398 (1993)

木瀬秀夫筑波大学, 物質工学系, 助教授 (20013170)