1993 Fiscal Year Annual Research Report

系統的マウス全胚培養法の確立と形態形成の解析及び発生工学への応用

Research Project

Project/Area Number	04454127
Research Institution	Shimane Medical University
Principal Investigator	田中修島根医科大学, 医学部, 教授 (50025615)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	橋本龍樹島根医科大学, 医学部, 助手 (90252907) 帯刀禮子島根医科大学, 医学部, 助手 (10112129) 八田稔久島根医科大学, 医学部, 助手 (20238025) 大谷浩島根医科大学, 医学部, 助教授 (20160533)
Keywords	マウス全胚培養法 / 形態形成 / 発生工学 / 重層培養 / 子宮外胎仔発生法
Research Abstract	胚盤胞期から着床以後のマウスの発生について観察するため、胚培養方法の開発・検討を行った。本研究において、ラット血清を用い、重層培養法を利用して胚静置培養を行った。Feeder cellとして、妊娠12または13日マウス胎盤細胞と、妊娠3日のマウス子宮内膜細胞を用いた。その結果、胚が原始線条期まで発生する頻度は、胎盤細胞をFeeder cellとして利用した場合が最も頻度が高く、子宮内膜細胞やコラーゲンをコートしたシャーレのみでは、培養した胚すべてが途中で発生が止まった。Feeder cellからの分泌物の作用を確かめるため、胚と接触せずに培養できるMillicell(Millipore社)や胎盤細胞を培養したconditioned mediumを用いて培養した。その結果、胎盤細胞による重層培養と同程度の頻度で発生した。これらの結果、着床後の胚の発生には胎盤の細胞より分泌される物質が必要であることが示唆された。一方、子宮切開法を用いたマウス胎児への外来遺伝子の導入法と、様々な発生現象に関与する各種ペプチドの生理活性についてのin vivoにおける検索方法の確立を行った。胎児への外来遺伝子の導入に関しては、リポソームの担体としての利用を検討したが、この方法では高濃度のDNAを胎児へ注入することが容易ではなく、否定的な結果が得られた。また、高濃度DNA溶液(Lac Z)を直接マウス14日胎児腹腔へ注入した群で、その後の発生各時期において導入遺伝子の発現が強く示唆される個体が得られ、現在検討中である。DNAの構造に関して、現在linearおよびcircularのものをそれぞれ用いて検討している。発生現象に関与する生理活性ペプチドのin vivoにおける解析に関しては、特に細胞接着に重要な役割を果たしているRGDペプチドの大脳発生における意義を検討し、脳室帯で増殖した神経細胞の新皮質への分布には重要な役割を有していることが示唆された。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 田中修: "遺伝子工学・発生工学の応用による先天代謝異常実験動物モデルの新たな展開" 小児科診療. 56. 637-642 (1993)
[Publications] 田中修: "胎児科学の基礎-ヒトの発生・成立" 教育と医学. 41. 417-425 (1993)
[Publications] John M.Greene: "A novel family of retrotransposon-like elements in Xenopus laevis with a transcript inducible by two growth factors" Nucleic Acids Reserch. 21. 2375-2381 (1993)
[Publications] Takafumi Tadano: "Differential induction of regulatory genes during mesoderm formation in Xenopus laevis embryos" Developmental Genetics. 14. 204-211 (1993)
[Publications] M.Taira: "Expression of LIM class homeobox gene Xlim-3 in Xenopus development is limited to neural and neuroendocrine tissues." Developmental Biology. 159. 245-256 (1993)
[Publications] 田中修: "分子生物・遺伝学:染色体異常" 生体の科学. 44. 468-469 (1993)
[Publications] 田中修: "分子病理学-疾病の分子機構胚工学と発生異常" 文光堂, PP510-514 (1993)
[Publications] 田中修: "現代病理学大系第23巻C、神経疾患III 奇形" 中山書店, PP3-80 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

系統的マウス全胚培養法の確立と形態形成の解析及び発生工学への応用

Principal Investigator

田中 修 島根医科大学, 医学部, 教授 (50025615)

Research Products

[Publications] 田中 修: "遺伝子工学・発生工学の応用による先天代謝異常実験動物モデルの新たな展開" 小児科診療. 56. 637-642 (1993)

[Publications] 田中 修: "胎児科学の基礎-ヒトの発生・成立" 教育と医学. 41. 417-425 (1993)

[Publications] John M.Greene: "A novel family of retrotransposon-like elements in Xenopus laevis with a transcript inducible by two growth factors" Nucleic Acids Reserch. 21. 2375-2381 (1993)

[Publications] Takafumi Tadano: "Differential induction of regulatory genes during mesoderm formation in Xenopus laevis embryos" Developmental Genetics. 14. 204-211 (1993)

[Publications] M.Taira: "Expression of LIM class homeobox gene Xlim-3 in Xenopus development is limited to neural and neuroendocrine tissues." Developmental Biology. 159. 245-256 (1993)

[Publications] 田中 修: "分子生物・遺伝学:染色体異常" 生体の科学. 44. 468-469 (1993)

[Publications] 田中 修: "分子病理学-疾病の分子機構 胚工学と発生異常" 文光堂, PP510-514 (1993)

[Publications] 田中 修: "現代病理学大系第23巻C、神経疾患III 奇形" 中山書店, PP3-80 (1993)

田中修島根医科大学, 医学部, 教授 (50025615)

[Publications] 田中修: "遺伝子工学・発生工学の応用による先天代謝異常実験動物モデルの新たな展開" 小児科診療. 56. 637-642 (1993)

[Publications] 田中修: "胎児科学の基礎-ヒトの発生・成立" 教育と医学. 41. 417-425 (1993)

[Publications] 田中修: "分子生物・遺伝学:染色体異常" 生体の科学. 44. 468-469 (1993)

[Publications] 田中修: "分子病理学-疾病の分子機構胚工学と発生異常" 文光堂, PP510-514 (1993)

[Publications] 田中修: "現代病理学大系第23巻C、神経疾患III 奇形" 中山書店, PP3-80 (1993)