1992 Fiscal Year Annual Research Report

脳神経細胞のカルシニューリンの存在形式の動的変化及びその機能的意義の解明

Research Project

Project/Area Number	04454138
Research Institution	Kagawa Medical School
Principal Investigator	畠瀬修香川医科大学, 医学部, 教授 (50033220)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	徳田雅明香川医科大学, 医学部, 助手 (10163974) 板野俊文香川医科大学, 医学部, 助手 (60145042) 松井秀樹香川医科大学, 医学部, 助教授 (30157234)
Keywords	カルシニューリン / ラット脳 / カルシウムイオン / 脱リン酸化反応 / A,Bサブユニット / 神経細胞 / ミリストイル化
Research Abstract	カルシニューリン(CaN)のラット脳における存在の多様性につき検討した。イムノブロット法にても,免疫組織染色法にても,脳の各部において決して均一な分布をしているわけではないことが示された。濃度分布は海馬≧線状体≧大脳皮質>小脳>>上部脳幹≧下部脳幹の順でホロエンザイムが分布していた。CaNを構成している2つのサブユニット(AおよびB)についてはほぼホロエンザイムと同様の傾向にあったが,Aに比べBの方が部位間の隔差が少なかった。即ち,Bの方がより均一な分布を示した。AとBの含量比を計算すると唯一大脳皮質において従来報告されている1:1の比を示したが,他の部位についてはBの方がAより多く,特に上,下脳幹においてはBがAの約2.5倍存在していた。DEAEクロマトグラフ法,ゲル濾過クロマトグラフ法等により,この過剰なBサブユニットの一部がフリーの形で存在している可能性が示され,実際にモノマーの形で精製に成功した。このBサブユニットはホロエンザイムを構成しているBサブユニットと分子量,抗原性,熱安定性,Ca^<2+>結合性等の点で同一であった。以上の成果につき,論文にまとめ,J.Biol.Chem.に投稿中である。膜結合性と細胞質型(可溶化型)CaNの解析についても,2,3の新知見が得られた。A,B両サブユニットで膜結合に必要なCa^<2+>イオン濃度に差があること,Aに比べてBの移動量が3〜4倍も多いこと,Bサブユニット分子上へのミリストイル酸付加によりCa^<2+>の効果を変化させる可能性のあること等である。機能解析の1つとしては,神経細胞の初代培養系にCaNマイクロインジェクションを行い,コントロール群とのCa^<2+>の動態に及ぼす変化を画像解析法,パッチクランプ法により検討している。また,CaNのBサブユニットのクローニングやアイソフォームの精巣における役割についても同時に検討している。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Hajime Nishio: "Identification of testis specific calcineurin β subunit isoform by a monoclonal antibody and detection of a specific six amino acid sequence." Biochem.Biophys.Res.Commun.182. 34-38 (1992)
[Publications] Hajime Nishio: "The evidence for post-meiotic expression of a testis-specific isoform of a regulatory subunit of calcineurin using a monoclonal antibody." Biochem.Biophys.Res.Commun.187. 828-831 (1992)
[Publications] 松井秀樹: "ラット精巣特異的カルシニューリンβ・アイソフォームの構造と生理的意義" 第69回日本生理学会大会予稿集. 254- (1992)
[Publications] Hideki Matsui: "Identification and developmental study of calcineurin β subunit isoformsin rat testis and brain." First IUBMB Conference Biochemistry of Diseases, Abstracts. 314- (1992)
[Publications] Masaaki Tokuda: "Possible mechanism of translocation of calcineurin between membrane and cytosol fractions." First IUBMB Conference Biochemistry of Diseases, Abstracts. 314- (1992)
[Publications] 徳田雅明: "カルシニューリンのαとβとサブユニットの存在様式は多様性があり一部はフリーの形で存在している。" 第65回日本生化学会大会発表抄録集. 64. 919- (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

脳神経細胞のカルシニューリンの存在形式の動的変化及びその機能的意義の解明

Principal Investigator

畠瀬 修 香川医科大学, 医学部, 教授 (50033220)

Research Products

[Publications] Hajime Nishio: "Identification of testis specific calcineurin β subunit isoform by a monoclonal antibody and detection of a specific six amino acid sequence." Biochem.Biophys.Res.Commun.182. 34-38 (1992)

[Publications] Hajime Nishio: "The evidence for post-meiotic expression of a testis-specific isoform of a regulatory subunit of calcineurin using a monoclonal antibody." Biochem.Biophys.Res.Commun.187. 828-831 (1992)

[Publications] 松井 秀樹: "ラット精巣特異的カルシニューリンβ・アイソフォームの構造と生理的意義" 第69回日本生理学会大会予稿集. 254- (1992)

[Publications] Hideki Matsui: "Identification and developmental study of calcineurin β subunit isoformsin rat testis and brain." First IUBMB Conference Biochemistry of Diseases, Abstracts. 314- (1992)

[Publications] Masaaki Tokuda: "Possible mechanism of translocation of calcineurin between membrane and cytosol fractions." First IUBMB Conference Biochemistry of Diseases, Abstracts. 314- (1992)

[Publications] 徳田 雅明: "カルシニューリンのαとβとサブユニットの存在様式は多様性があり一部はフリーの形で存在している。" 第65回日本生化学会大会発表抄録集. 64. 919- (1992)

畠瀬修香川医科大学, 医学部, 教授 (50033220)

[Publications] 松井秀樹: "ラット精巣特異的カルシニューリンβ・アイソフォームの構造と生理的意義" 第69回日本生理学会大会予稿集. 254- (1992)

[Publications] 徳田雅明: "カルシニューリンのαとβとサブユニットの存在様式は多様性があり一部はフリーの形で存在している。" 第65回日本生化学会大会発表抄録集. 64. 919- (1992)