NDPキナーゼの細胞増殖、分化における役割についての研究

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04454162
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• Principal Investigator: 木村 成道 (財)東京都老人総合研究所, 分子生物学部門, 室長 (60073029)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 石川 直 (財)東京都老人総合研究所, 分子病理部門, 研究員 (30184485) ; 田口 隆彦 (財)東京都老人総合研究所, 分子生物部門, 研究員 (80073005) ; 副田 貢 (財)東京都老人総合研究所, 分子生物部門, 助手 (30100126) ; 島田 信子 (財)東京都老人総合研究所, 分子生物部門, 助手 (60158962)
• Keywords: ヌクレオシドニリン酸(NDP)キナーゼ / nm23 / 細胞増殖 / 分化

Research Abstract

1)細胞増殖におけるNDPキナーゼの役割を解明する方法として2つのアプローチを試みた。第一に、酵母(Saccaromyces cerevisiae)NDPキナーゼ遺伝子の単離を行い、その過剰発現、および遺伝子破壊の増殖能、胞子形成能、生殖能などに対する影響を調査した。その結果、NDPキナーゼレベルの変動によるこれらの形質に対する影響はほとんど見られないことが判った。しかしながら、遺伝子破壊細胞において野生株の約10%の酵素活性が残存していることが観察されており、NDPキナーゼの役割を正確に推定するうえで解決すべき問題のあることも明らかになった。第二に、NDPキナーゼの発現が癌組織においてしばしば〓進している事実に基づき、正常細胞の癌化過程の初期に起こるとされる不死化現象とNDPキナーゼ発現の動態について検討した。ヒト正常2倍体細胞とその不死化細胞を4組選び、発現を調べたところいずれも不死化細胞群において高い発現の見られることが判明した。この発現の〓進は2種のアイソフォームの両方に認められることが判った。
2)細胞分化とNDPキナーゼとの関係について表皮細胞をモデル実験系として解析を進めた。動物組織には2種のアイソフォームの存在が知られているが、表皮組織について検討を進めたところ等電点のことなる数種のアイソフォームの存在することが示唆された。これらの検出には特異抗体を使用しているので新規関連蛋白質の存在が予測されるが今迄のところその同定にいたっていない。

Research Products

• [Publications] Shimada,N.et al.: "A second from (beta isofrom)of nucleoside diphosphate kinase from rat ." J.Biol.Chem.22GD01:268 ,. 2583-2589 (1993)
• [Publications] Fukuchi,T.et al.: "Isolation,overexpression and disruption of a Saccharomyces cerevisiae YNK gene encoding nucleoside diphosphate kinase." Gene. 129. 141-146 (1993)
• [Publications] Kimura,N.: "Role of nucleoside diphosphate Kinase in G-protein action.21GC03:GTPases in Biology II(eds.Dickey,B.and Birnbaumer,L.),Handboo kof Experimental Pharmacology" 108/II. 485-498 (1993)
• [Publications] Golden,A.et al.: "Nucleoside diphosphate kinase, nm23 and tumor metastasis:Possible biochemical mechanisms." Oncogenes and Tumor Suppressor Genes in Human Malignancies. 345-358 (1993)
• [Publications] Fukuchi,T. et. al.: "Recombinant rat nucleoside diphosphate kinase isoforms (alphaandbeta):purification, properties and application to immunological detection of native isoforms in rat tissues." Biochim. Biophys. Acta. in press. (1994)
• [Publications] 木村成道: "癌抑制遺伝子" Biomedical Perspectives. 2. 183-193 (1993)