免疫病態における免疫応答のプロテインホスフアターゼによる解析

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04454164
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 菊池 九二三 北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (20006117)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松澤 秀一 北海道大学, 免疫科学研究所, 助手 (80239003) ; 水野 佑亮 北海道大学, 免疫科学研究所, 助教授 (00002121)
• Keywords: プロテインホスフアターゼ / セリン / スレオニン ホスフアターゼ / チロシンホスフアターゼ / MRL / 1prマウス / PP1 / PP2A / PP2B / PP2C

Research Abstract

免疫担当細胞の情報伝達におけるプロテインホスフアターゼの役割を明らかにする目的で,免疫担当臓器および細胞の粗抽出液でのセリン/スレオニン残基特異的プロテインホスフアターゼの分子種PP1,PP2A,PP2B(カルシニューリン),PP2Cの分別定量法を確立し,これを用いと自己免疫疾患モデルマウス(1prマウス)における活性を測定し,病態変異を解析した。さらにチロシン残基特異的プロテインホスフアターゼ(チロシンホスフアターゼ)の測定も行った。その結果以下の知見を得た。PP1活性では,T細胞はB細胞より明らかに高値を示し,1prではT,Bいずれにおいても著変を認めなかった。したがって,組織レベルの1prにおけるPP1活性の上昇は,B細胞より高値を示す1prの異常T細胞の集積によると結論された。PP2A活性では,T,B両細胞とも正常では同程度の活性を有していたが,1prでは,B細胞ではほとんど活性の変化を認めなかったが,T細胞では1prで明かな活性上昇を認めた。したがって,組織レベルでの,1prにおけるPP2A活性の明かな上昇は,1prで集積する異常T細胞の高いPP2A活性によることが結論された。PP2Bでは,1prの脾で1,5倍の上昇が認められたが,細胞レベルでみると,B細胞で著変はなく,T細胞で特異的な上昇が認められた。チロシンホスフアターゼ活性については,至適条件の検索が終り,現在組織レベルで活性測定を行っているが,CD45が局在する膜画分の活性よりも,可溶画分での活性の上昇が顕著のように思われる。また1prの肝で著明なPTP活性の上昇を認めた。以上より,本酵素の活性の1prでの変異について,組織レベルでの変化を細胞レベルで捉えることに成功した。これらの免疫担当細胞における本酵素の病態変異の意義について,とくに細胞内伝達情報機構の立場から解析を進めている。

Research Products

• [Publications] Kitamura K.et al.: "mRNA levels of catalytic subunits of protein phosphatases 1.2A,and 2C in hepatocarcinogenesis." Jpn.J.Cancer Res.83(1). 66-71 (1992)
• [Publications] Matsuzawa S.et al.: "Increase in potential activities of protein phosphatases PP1 and PP2A in lymphoid tissues of autoimmune MRL/MpJ-1pr/1pr mice." J.Biochem.111(4). 472-477 (1992)
• [Publications] Kakinoki Y.et al.: "Gene expressions and activities of protein phosphatases PP1 and PP2A in rat liver regeneration after partial hepatectomy." Biochemical and Biophysical Research Communications. 185(1). 291-297 (1992)
• [Publications] Nakamura K.et al.: "Cell cycle dependent gene expressions and activities of protein phosphatases PP1 and PP2A in mouse NIH3T3 fibroblasts." Biochemical and Biophysical Research Communications. 187(1). 507-514 (1992)
• [Publications] Kitamura K.et al.: "Selective high expression of protein phosphatase PP1 α mRNA in rat poorly differentiated ascites hepatomas." International Journal of Oncology. 2(2). 237-240 (1993)
• [Publications] Kikuchi K.et al.: "Expressions and activities of protein phosphatases during carcinogenesis,regeneration,and cell cycle." Advances in Protein Phosphatase. 7. 219-234 (1993)