1993 Fiscal Year Annual Research Report
免疫病態における免疫応答のプロテインホスファターゼによる解析
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04454164
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| Research Institution | HOKKAIDO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
菊池 九二三 北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (20006117)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松澤 秀一 北海道大学, 免疫科学研究所, 助手 (80239003)
水野 佑亮 北海道大学, 免疫科学研究所, 助教授 (00002121)
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| Keywords | プロテインホスファターゼ / 免疫病態 / 自己免疫疾患 / 免疫応答 / CTLL-2 / PP1 / 蛋白脱リン酸 / IL-2 |
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| Research Abstract |
免疫担当細胞の情報伝達におけるプロテインホスファターゼの役割を明らかにする目的で,免疫担当細胞の粗抽出液でのセリン/スレオニン残基特異的プロテインホスファターゼ分子種PP1,PP2A,PP2Cの分別定量法を用いて,T細胞株CTLL-2のIL-2刺激に対する応答について解析した。CTLL-2をIL-2でインキュベートすると,直ちにPP1のCa^<2+>-トリプシン処理活性すなわちポテンシャル活性が減少した。この減少は,刺激後20分で最大に達し,全体の20-30%に達する。また一過性で,20分後活性は上昇し,45分でコントロールレベルまで回復した。IL-2の濃度の影響を調べたところ,0.025nM以上の濃度でみられ,この濃度は,IL-2の細胞増殖刺激効果が発揮される濃度とほぼ同程度であった。次にこのPP1活性減少のみられる分子種の細胞内局在を調べたところ,この減少は,PP1分子の細胞質局在を示す分子に選択的に起こることがわかり,顆粒画分のPP1はIL-2に対して不変であった。またIL-2刺激で,PP2A,PP2Cの活性も不変であったので,PP1分子に特異的にみられる現象である。次に,この現象がCTLL-2に特異的にみられるものか,他のT細胞にもみられるかを調べるために,C57BL/6マウスからConAによって誘導されたIL-2感受性細胞を調製してIL-2に対する影響をみたところ,CTLL-2におけると同様の応答が確認された。またPP1触媒サブユニットに対する抗体を用いて,IL-2刺激後のPP1蛋白をウエスタンブロット法で解析したところ,PP1蛋白量は一定であった。したがって,IL-2刺激によってみられるT細胞のプロテインホスファターゼ応答は,分子種PP1に特異的にみられ,分単位で可溶画分に限局して観察され,IL-2濃度依存性で一過性に現れるので,PP1分子の2次的修飾によることが強く示唆される。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Norio Takizawa: "Selective increases in isoform PP1α of type-1 protein phosphatase in ascites hepatoma cells." Japanese Journal of Cancer Research. 85(印刷中). (1994)
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[Publications] Mostafa Saasat: "Gene expression of protein phosphatases in rat ascites hepatoma cell lines." Cancer Detection and Prevention. 18(印刷中). (1994)
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[Publications] Chika Katagiri: "Increases in protein phosphatase 2B activity in lymphoid tissues and T-lymphocytes of autoimmune MRL/MpJ-lpr/lpr mice." Journal of Biochemistry. 114. 874-878 (1993)
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[Publications] Kunimi Kikuchi: "Expressions and activities of protein phosphatases during carcinogenesis,regeneration,and cell cycle." Advances in Protein Phosphatases. 7. 221-236 (1993)
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[Publications] Shu-ichi Matsuzawa: "IL-2 induces transient and specific decrease in cytosolic protein phosphatase PP1 activity in murine T cell lines." Biochemical and Biophysical Research Communications. 195. 989-996 (1993)
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[Publications] Tang Zhu: "Alterations in activities of protein phosphatases PP1 and PP2A in T and B lymphocytes of autoimmune MRL/MpJ-lpr/lpr mice." Journal of Biochemistry. 114. 50-54 (1993)
