ジストロフィン関連遺伝子のクローニング

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04454258
• Research Institution: National Center of Neurology and Psychiatry
• Principal Investigator: 荒畑 喜一 国立精神・神経センター, 神経研究所・疾病研究第一部, 部長 (30053325)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平澤 恵理 国立精神, 神経センター・神経研究所・疾病研究第一部, 研究生 ; 織茂 智之 国立精神, 神経センター・神経研究所・疾病研究第一部, 研究生 ; 林 由起子 国立精神, 神経センター・神経研究所・疾病研究第一部, 流動研究員 ; 塚原 俊文 国立精神, 神経センター・神経研究所・疾病研究第一部, 研究員 (60207339) ; 武田 伸一 国立精神, 神経センター・神経研究所・疾病研究第一部, 室長 (90171644)
• Keywords: ジストロフィン / ジストロフィン関連遺伝子 / 筋ジストロフィー / 遺伝子解析 / 顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー / 筋緊張性ジストロフィー

Research Abstract

本研究は、ヒト大脳および骨格筋のcDNAライブラリーからジストロフィン関連遺伝子の単離と、神経・筋疾患の病因関連遺伝子の同定を目指して来たものである。今年度はとくに、顔面肩甲上腕型筋ジストロフィー(FSHD)関連遺伝子のクローニングと遺伝子診断を実施した。
我々はFSHDの原因遺伝子をクローン化し、その構造と機能を明らかにするために研究を進めFSHDに特異性の高い新しいプローブの作製及びFSHDゲノムライブラリーの作製を試みた。そしてコスミドクローンC51(Wijmengaら、1992)、プラスミドpSM1(Weiffenbachら、1993)について制限酵素マッピング及びサブクローン化を行い、FSHD関連EcoRI断片に特異性が高い新しいプローブpFR1を作製した。またFSHD関連ゲノム断片はEcoRI,HindIIIの二重消化によりさらに短くなる事が分かった。現在、FSHD症例ST13についてEcoRI,HindIIIの二重消化による断片のゲノムライブラリーを作製して、新しいプローブpFR1を用い、PCR法、コロニハイブリダイゼイション法、サザン法でスクリーニングを行っている。
これまでにFSHD関連遺伝子に特徴的とされる3.3kbリピートユニットの遺伝子構造を決定した。

Research Products

• [Publications] Koga R,Ishiura S,Arahata K et al.: "Quantitative analysis of dystrophin in human and rodent muscles." Biomed.Res.13. 215-219 (1992)
• [Publications] Hoffman E.P,Arahata K,Minetti C,et al.:"Dystrophinopathy in isolated cases of myopathy in females." Neurology. 42. 967-975 (1992)
• [Publications] 荒畑喜一:"筋ジストロフィーの遺伝子診断" 医学のあゆみ. 162. 630-636 (1992)
• [Publications] Arahata K and Sugita H:"Molecular genetic diagnosis of muscular dystrophies." Proc.of the Third International Bioethics Seminar in Fukui. (In Press).
• [Publications] Arahata K,Lee J.H,Goto K,et al.:"Genetic analysis of facioscapulohumeral muscular dystrophy." Neuromuscular Disorders. (In Press).
• [Publications] Arahata K and Sugita H:"Cellular Membrane" Ohnishi S and Ohnishi T: CRC Press, 412 (1992)
• [Publications] 荒畑喜一:"臨床遺伝医学 III 分子病 古庄俊行ほか編," 診断と治療社, 643 (1993)