1993 Fiscal Year Annual Research Report

血管緊張亢進の成因と新しい血管拡張薬の開発に関する分子細胞生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	04454268
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	金出英夫九州大学, 医学部, 教授 (80038851)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	西村淳二九州大学, 医学部, 講師 (90237727) 小林誠九州大学, 医学部, 助教授 (80225515)
Keywords	血管平滑筋 / 細胞質カルシウム濃度 / 血管内皮細胞 / エンドセリン受容体 / 血管拡張薬
Research Abstract	本研究は、分子・細胞レベルにおいて、血管系の各種細胞情報伝達系とその相互作用を明かにすること、情報伝達系の病的変化という観点から血管緊張の病的亢進の機序を解明し、新しい血管拡張薬を開発するための理論的基礎を作ることを目的とした。本年度は内皮細胞にエンドセリン(ET)ETA受容体が存在するか、否かについて、薬理学的および分子生物学的方法を用いて検討した。 (1)内皮細胞細胞質Ca濃度、(Ca)i、測定実験:ET‐1は、等濃度のET‐3よりも、明かに大きな一過性の(Ca)i上昇を内皮細胞に引き起こした。ET‐3投与に重ねてET‐1を投与すると、さらなる(Ca)iの上昇が見られるが、ET‐3をET‐1に重ねて投与しても、(Ca)iの上昇は見られなかった。また、ET‐1によって惹起される(Ca)iの上昇はETA受容体のアンタゴニストであるBQ123により部分的に抑制された。以上の薬理学的実験より、豚大動脈弁上の内皮細胞には機能的にETA受容体の存在することが示された。 (2)分子生物学的実験:PCR法を用いて、豚ETA受容体cDNAの塩基配列を決定した。これは牛のETA受容体の塩基配列と92%の相同性を示し、アミノ酸レベルでは97%の相同性を示た。豚大動脈弁上の内皮細胞より得られた全RNAと豚ETA受容体cDNAの塩基配列よりデザインされたプライマーを用いてRT‐PCRを行ったところ、特異的バンドが検出された。このPCR産物をゲルより切出し、塩基配列を決定したところ、豚ETA受容体cDNAの塩基配列と全く同一であった。薬理学的および分子生物学的方法の両者によって、豚大動脈弁上の内皮細胞にはETA受容体が存在し、機能していることを証明した。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] K.Hirano: "Enhancement by captoril of bradykinin‐induced calcium transients in cultured endothelial cells of the bovine aorta." Eur J Pharmacol. 244. 133-137 (1993)
[Publications] T.Kai: "Effect of lidocaine on intracellular Ca^<2+> and tension in airway smooth muscle." Anesthesiology. 78. 954-965 (1993)
[Publications] C.Watanabe: "Extracellular Ca^<2+>‐dependent potentiation by cocaine of seroton‐in‐and norepinephrine induced contractions in rat vascular smooth muscle." Circ Res. 72. 1191-1201 (1993)
[Publications] M.Kuroiwa: "Role of GTP‐protein and endothelium in contraction induced by ethanol on pig coronary artery." J.Physiol. 470. 521-537 (1993)
[Publications] H.Aoki: "Relationship between cytosolic calcium concentration and force in the papaverine‐induced relaxation of the medial strips of pig coronary artery." Br J Pharmacol,. (in press).
[Publications] K.Hirano: "Cytosolic Ca^<2+> transients in endothelium‐dependent relaxation of pig coronary artery." Eur J Pharmacol,. (in press).
[Publications] H.Kanaide: "Endothelium‐derived factors and vascular functions," Elsevier,Science Publisher,The Netherlands (in press),

1993 Fiscal Year Annual Research Report

血管緊張亢進の成因と新しい血管拡張薬の開発に関する分子細胞生物学的研究

Principal Investigator

金出 英夫 九州大学, 医学部, 教授 (80038851)

Research Products

[Publications] K.Hirano: "Enhancement by captoril of bradykinin‐induced calcium transients in cultured endothelial cells of the bovine aorta." Eur J Pharmacol. 244. 133-137 (1993)

[Publications] T.Kai: "Effect of lidocaine on intracellular Ca^<2+> and tension in airway smooth muscle." Anesthesiology. 78. 954-965 (1993)

[Publications] C.Watanabe: "Extracellular Ca^<2+>‐dependent potentiation by cocaine of seroton‐in‐and norepinephrine induced contractions in rat vascular smooth muscle." Circ Res. 72. 1191-1201 (1993)

[Publications] M.Kuroiwa: "Role of GTP‐protein and endothelium in contraction induced by ethanol on pig coronary artery." J.Physiol. 470. 521-537 (1993)

[Publications] H.Aoki: "Relationship between cytosolic calcium concentration and force in the papaverine‐induced relaxation of the medial strips of pig coronary artery." Br J Pharmacol,. (in press).

[Publications] K.Hirano: "Cytosolic Ca^<2+> transients in endothelium‐dependent relaxation of pig coronary artery." Eur J Pharmacol,. (in press).

[Publications] H.Kanaide: "Endothelium‐derived factors and vascular functions," Elsevier,Science Publisher,The Netherlands (in press),

金出英夫九州大学, 医学部, 教授 (80038851)