破骨細胞株の樹立と前破骨細胞の分化の細胞・免疫学的解析

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04454464
• Research Institution: Niigata University
• Principal Investigator: 鈴木 〓俊 新潟大学, 歯学部, 教授 (10013905)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 川瀬 知之 新潟大学, 歯学部, 助教授 (90191999) ; 折笠 道昭 新潟大学, 歯学部, 助手 (30185681)
• Keywords: 1,25-Dihydroxyvitamin D_3 / Colony-stimulating factor / Macrophage,Granulocyte differentiation

Research Abstract

マウスマクロファージ様株細胞とマクロファージコロニー刺激因子(M-CSF)で刺激したマウス骨髄細胞との細胞融合により得られた前破骨細胞様ハイブリドーマの多くは継代により染色体の脱落が認められ、形質維持に難があることから、マウス骨髄細胞の刺激方法の検討を含めて、活性型ビタミンD_3とCSFによる骨髄細胞の分化誘導機序解析を実施した。
マウス骨髄細胞を20%馬血清加α-MEMにて6日間培養し、その間3日目を境として活性型ビタミンD_3とM-CSFおよびGM-CSFの存在ならびに非存在を組合せ、分化抗原(Mac-1:CD11b,F4/80)の発現、および機能発現(非特異的貪食能、H_2O_2およびIL-1の産生能を検索した。M-CSFとGM-CSFは単独でMac-1抗原を増加させたが、活性型ビタミンD_3単独では効果が認められなかった。しかしながら、活性型ビタミンD_3とM-CSFとの連続的な感作はその作用を促進させ、Mac-1およびF4/80抗原を増加させた。更に、段階的な感作ではM-CSFとGM-CSFに顕著なMac-1抗原の増加をもたらした。機能の発現では、同様に連続および段階的に活性型ビタミンD_3とM-CSFで刺激した結果、非特異的貪食能とH_2O_2産生がそれぞれ単独感作と比較し、亢進したがGM-CSFとの組合せでは連続的感作で非特異的貪食能のみを増加させた。また、活性型ビタミンD_3とGM-CSFの連続的な感作はnon-specific esterase陽性細胞を発生させ、飛躍的なIL-1の産生を招来したが、段階的な感作ではchloroacetate esterase陽性細胞を発生させ、そのIL-1産生量はGM-CSF単独感作以下であった。以上の結果は活性型ビタミンD_3はM-CSFならびにGM-CSFによる分化を促進すると共に、GM-CSFによるマクロファージと顆粒球の分化の方向性も制御することを強く示唆するものである。

Research Products

• [Publications] Orikasa,M.et al.: "Induction of macrophagic and granulocytic differentiation of murine bone marrow progenitor cells by 1,25-dihydroxyvitamin D_3." Calcified Tissue International. 53. 193-200 (1993)