1993 Fiscal Year Annual Research Report

アルカリ性ホスファターゼ分子中C末端構造を変換する酵素の検出とその局在

Research Project

Project/Area Number	04454548
Research Institution	SAITAMA MEDICAL SCHOOL
Principal Investigator	菰田二一埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (10049835)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小山岩雄埼玉医科大学短期大学, 臨床検査科, 助教授 (30153688) 坂岸良克埼玉医科大学, 医学部, 教授 (90049768)
Keywords	アルカリ性ホスファターゼ / GPI-アンカー / ペプチドアンカー / C末端変換酵素 / 細胞下分画 / ミクロソーム分画 / 分子量
Research Abstract	生体膜結合酵素であるアルカリ性ホスファターゼ(ALP)分子は、通常C末端アミノ酸には糖脂質様構造(Glycan-phosphatidylinositol anchor)を持っているが、ヒト肺癌組織に検出される胎盤様ALPあるいはNitrosomethylurea(MIVU)で発癌させたラット胃癌組織に認められる小腸様ALP分子のC末端にはGPI-アンカーを持たず、その前駆体であるペプチドアンカーを持つALPが生化学的並びに免疫組織化学的に増加することを平成4年度の科学研究費実績として報告した。平成5年度は、先づ癌化に伴うALP分子のC末端構造が、アセチル化したGPI-アンカー構造を持っていないかどうか、確かにGPI-アンカーが無いかをPIPLO処理やGPI-アンカーに対する抗体で検討したところ、癌化に伴ってGPI-アンカー含量が著明に低下することを確認した。次にGPI-アンカーを持つ成熟型ALPのアミノ酸配列のC末端6残基より前駆体ALPの疎水性ペプチドの前半13残基にまたがるペプチドを合成し、この合成ペプチドより前駆体ALPの疎水性ペプチド配列のみを切断する活性(つまりペプチドアンカーよりGPI-アンカーへ変換すると思われるputative transamidase)を調べたところ、細胞下分画上、ミクロソーム分画にその活性が最も高く、細胞上清やミトコンドリア分画には低かった。更にミクロソーム分画を界面活性化剤にて可溶化後、これをゲル濾過すると、前駆体ALP合成ペプチドを選択的に切断する活性は、分子量としておよそ110キロダルトンに検出された。本研究によって新しく発見できたALP C末端ペプチドアンカーからGPI-アンカーへ変換に関与すると思われる本酵素は、今後GPI-アンカーを持つ膜タンパク共通の構造や機能を予測する上で、重要な指標となり得るものと考えられる。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Hoshino,T.,Kumasaka,K.,Komoda,T.et al.: "A case of benign familial hyperphosphatasemia of intestinal origin" Clinical Biochemistry. 26. 421-425 (1993)
[Publications] Hoshino,T.,Kumasaka,K.,Komoda,T.et al.: "Abnormal alkaline phosphatase of hepatic-type in cerebrospinal fluid of a patient with intracranial metastasis from lung cancer" Journal of Clinical Pathology. 46. 1059-1061 (1993)
[Publications] Miura,M.,Sakagishi,Y.,Hata,K.,Komoda,T.: "Differences between the sugar moieties of liver- and bone-type alkaline phosphatases:A re-evaluation" Annals of Clinical Biochemistry. 31. 25-36 (1994)
[Publications] Komoda,T.,Koyama,I.,Sakagishi,Y.et al.: "Enhanced expression of nascent alkaline phosphatases bearing a hydrophobic peptide anchor with alignant transformation" The Clinical Biochemist-Reviews(Int.Symp.on Clin.Enzymol.). 14. S38 (1993)
[Publications] Irino,T.,Matsushita,M.,Sakagishi,Y.Komoda,T20GB05:Phosphorylcholine as a unique substrate for human intestinal alkaline phosphatase: International Journal of Biochemistry. 26(in press). (1994)
[Publications] Yamagishi,F.,Komoda,T.,Alpers,D.H.et al.: "The clearance of surfactant-like particle(SLP) proteins from the circulation in rats" American Journal of Physiology. 267(in press). (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

アルカリ性ホスファターゼ分子中C末端構造を変換する酵素の検出とその局在

Principal Investigator

菰田 二一 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (10049835)

Research Products

[Publications] Hoshino,T.,Kumasaka,K.,Komoda,T.et al.: "A case of benign familial hyperphosphatasemia of intestinal origin" Clinical Biochemistry. 26. 421-425 (1993)

[Publications] Hoshino,T.,Kumasaka,K.,Komoda,T.et al.: "Abnormal alkaline phosphatase of hepatic-type in cerebrospinal fluid of a patient with intracranial metastasis from lung cancer" Journal of Clinical Pathology. 46. 1059-1061 (1993)

[Publications] Miura,M.,Sakagishi,Y.,Hata,K.,Komoda,T.: "Differences between the sugar moieties of liver- and bone-type alkaline phosphatases:A re-evaluation" Annals of Clinical Biochemistry. 31. 25-36 (1994)

[Publications] Komoda,T.,Koyama,I.,Sakagishi,Y.et al.: "Enhanced expression of nascent alkaline phosphatases bearing a hydrophobic peptide anchor with alignant transformation" The Clinical Biochemist-Reviews(Int.Symp.on Clin.Enzymol.). 14. S38 (1993)

[Publications] Irino,T.,Matsushita,M.,Sakagishi,Y.Komoda,T20GB05:Phosphorylcholine as a unique substrate for human intestinal alkaline phosphatase: International Journal of Biochemistry. 26(in press). (1994)

[Publications] Yamagishi,F.,Komoda,T.,Alpers,D.H.et al.: "The clearance of surfactant-like particle(SLP) proteins from the circulation in rats" American Journal of Physiology. 267(in press). (1994)

菰田二一埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (10049835)