1992 Fiscal Year Annual Research Report

遺伝子工学を用いた糖輸送担体の構造と機能およびインスリン作用の解析

Research Project

Project/Area Number	04454557
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	岡芳知東京大学, 医学部(病), 助手 (70175256)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	犬飼浩一東京大学, 医学部(病), 医員石原寿光東京大学, 医学部(病), 医員片桐秀樹東京大学, 医学部(病), 医員浅野知一郎東京大学, 医学部(病), 助手
Keywords	糖輸送担体 / 遺伝子工学 / 構造と機能 / インスリン
Research Abstract	糖輸送担体の構造と機能の解析のために、遺伝子工学の手法を用いて変異糖輸送担体をCHO細胞に発現させてその機能を解析した。1個のアミノ酸の置換でも、糖輸送活性の著減をもたらすことも明かになってきた。その例として、GLUT1の388番目のアミノ酸であるトリプトファン、412番目のトリプトファン、415番目のアスパラギン、が挙げられる。これは、これらアミノ酸がグルコースの通路に面した重要な位置を占めていることを示唆している。また膜貫通部位1と2の間に存在するアスパラギンに結合する糖鎖の欠如した変異糖輸送担体を発現させると糖輸送活性が低下しており、この糖鎖はグルコースに対する親和性を高めるのに役立っていることが明かとなった。我々は以前に、C末端欠如変異糖輸送担体では糖輸送活性が失われることを示したが、C末端は糖輸送活性ばかりでなくアイソフォームの糖輸送特性にとっても重要であることが明らかとなった。糖輸送担体のアイソフォームのGLUT2は肝・膵β細胞などに特異的に発現し、GLUT1と比べ糖輸送のKmとVmaxは高い。そこでGLUT1とGLUT2の間で様々なキメラを作製して検討したが、GLUT1のC末端細胞内部分をGLUT2に置換するとKmとVmaxは上昇した。すなわち、GLUT1のC末端をGLUT2のC末端で置換すると、GLUT1にGLUT2らしさを付与することができた。

Research Products
(11 results)

All Other

All Publications (11 results)

[Publications] Asano,T.: "Up-regulation of GLUT2 mRNA by glucose,mannose,and fructose in isolated rat hepatocytes." Diabetes. 41. 22-25 (1992)
[Publications] Shibasaki,Y.: "Two glucose transporter isoforms are sorted differentially and are expressed in distinct cellular compartments." Biochem.J.281. 829-834 (1992)
[Publications] Asano,T.: "Glucose increases the papain susceptibility of GLUT1 glucose transporter" FEBS letters. 298. 129-132 (1992)
[Publications] Lin,J-L.: "Deletion of C-terminal 12 amino acids of GLUT1 protein does not abolish glucose transport activity." Biochem Biophys Res Commun.184. 865-870 (1992)
[Publications] Asano,T.: "Domains responsible for differential targeting of glucose transporter isoforms" J.Biol.Chem.267. 19636-19641 (1992)
[Publications] Katagiri,H.: "Replacement of intracellular C-terminal domain of GLUT1 glucose transporter with that of GLUT2 increases Vmax and Km of transport activity." J.Biol.Chem.267. 22550-22555 (1992)
[Publications] Asano,T.: "Characterization of GLUT3 protein expressed in Chinese hamster ovary cells" Biochem.J. 288. 189-193 (1992)
[Publications] Morita Y.: "Expression and possible function of glucose transporter protein GLUT1 during preimplantation mouse development from oocytes to blastocysts" Biochem Biophys Res Commun. 188. 8-15 (1992)
[Publications] Oka,Y.: "Expression of glucose transporter isoforms with aging" Gerontology. 38. 3-9 (1992)
[Publications] Oka,Y.: "Expression of glucose transporter isoforms in atrophied and enlarged muscle." Med.Sport Sci.37. 84-90 (1992)
[Publications] Katagiri,H.: "Nonsense mutation of the glucokinase gene in late-onset non-insulin dependent diabetes mellitus." Lancet. 340. 1316-1317 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

遺伝子工学を用いた糖輸送担体の構造と機能およびインスリン作用の解析

Principal Investigator

岡 芳知 東京大学, 医学部(病), 助手 (70175256)

Research Products

[Publications] Asano,T.: "Up-regulation of GLUT2 mRNA by glucose,mannose,and fructose in isolated rat hepatocytes." Diabetes. 41. 22-25 (1992)

[Publications] Shibasaki,Y.: "Two glucose transporter isoforms are sorted differentially and are expressed in distinct cellular compartments." Biochem.J.281. 829-834 (1992)

[Publications] Asano,T.: "Glucose increases the papain susceptibility of GLUT1 glucose transporter" FEBS letters. 298. 129-132 (1992)

[Publications] Lin,J-L.: "Deletion of C-terminal 12 amino acids of GLUT1 protein does not abolish glucose transport activity." Biochem Biophys Res Commun.184. 865-870 (1992)

[Publications] Asano,T.: "Domains responsible for differential targeting of glucose transporter isoforms" J.Biol.Chem.267. 19636-19641 (1992)

[Publications] Katagiri,H.: "Replacement of intracellular C-terminal domain of GLUT1 glucose transporter with that of GLUT2 increases Vmax and Km of transport activity." J.Biol.Chem.267. 22550-22555 (1992)

[Publications] Asano,T.: "Characterization of GLUT3 protein expressed in Chinese hamster ovary cells" Biochem.J. 288. 189-193 (1992)

[Publications] Morita Y.: "Expression and possible function of glucose transporter protein GLUT1 during preimplantation mouse development from oocytes to blastocysts" Biochem Biophys Res Commun. 188. 8-15 (1992)

[Publications] Oka,Y.: "Expression of glucose transporter isoforms with aging" Gerontology. 38. 3-9 (1992)

[Publications] Oka,Y.: "Expression of glucose transporter isoforms in atrophied and enlarged muscle." Med.Sport Sci.37. 84-90 (1992)

[Publications] Katagiri,H.: "Nonsense mutation of the glucokinase gene in late-onset non-insulin dependent diabetes mellitus." Lancet. 340. 1316-1317 (1992)

岡芳知東京大学, 医学部(病), 助手 (70175256)