1993 Fiscal Year Annual Research Report
腎臓に存在する新しい平滑筋作動性ペプチドの単離,構造決定とその生化学的研究
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04454566
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| Research Institution | NATIONAL CARDIOVASCULAR CENTER RESERCH INSTITUTE |
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Principal Investigator |
寒川 賢治 国立循環器病センター研究所, 生化学部, 部長 (00112417)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北村 和雄 宮崎医科大学, 医学部, 助手 (50204912)
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| Keywords | 平滑筋作動性ペプチド / 腎臓 / ラット血小板 / cAMP / アドレノメデュリン / cDNAクローニング / pro AM-N20 / 降圧活性ペプチド |
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| Research Abstract |
本研究において進めている腎における新しい平滑筋作動性ペプチドについては、これまでに分子量の異なる3種類の新しい活性ピーク(MW.8,000,6,000,4,000)を検出し、本年度は、ブタ腎臓10kgを出発材料として単離,精製を行っているが現在まだ進行中けあり、単離,構造決定には至っていない。しかし、これらの活性ピークはイオン交換クロマトグラフィー,逆相HPLCにおいても、アンジオテンシンやVIP,CGRPとは明らかに異なる位置に溶出されることから、これまで未知の新しい生理活性ペプチドであることが確認された。
一方、血小板中のcAMPを指標としたin vitroのアッセイ系を用いて循環調節に関与する未知の生理活性ペプチドの系統的検索を行った。その結果、ヒト褐色細胞腫組織より血小板cAMPを増加させる新しいペプチドを発見し、その単離,構造決定を行い、これを“adrenomedullin(アドレノメデュリン)"(AM)と命名した。AMは52個のアミノ酸よりなり、分子内に一個のジズルフィド結合とC末端アミド構造を有するペプチドで、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)とアミノ酸配列上一部ホモロジーが認められるが、全く新しいペプチドである。AMはラットに経静脈投与した時、強力で長時間持続する降圧活性を示し、また血中にもかなりの濃度存在することより、新しい循環調節ホルモンと考えられる。
さらに、cDNA解析によるAM前駆体構造解析の結果、AM前駆体タンパク質のN末端部にC末端アミド構造を持つ20残基の新たな生理活性ペプチド候補の存在することを見出し、このペプチドを“pro-adrenomedullin N20"(proAM-N20)と名付けた。AM前駆体mRNA発現は、主に副腎,肺,心臓,腎臓に見られその生理的役割が注目される。
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[Publications] Y.Ohyama,et al.: "HS-142-1,A novel antagonist for natriuretic petides,has no effect on the third member of membrance bound quanylate cyclases(GC-C)in T84 cells." Life Sci.52. 153-157 (1993)
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[Publications] M.Furuya,et al.: "C-type natriuretic peptide inhabits intimal thickening after vascular injury." Biochem.Biophys.Res.Commun.193. 248-253 (1993)
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[Publications] K.Kitamura,et al.: "Cloning and characterization of cDNA encoding a precursor for human adrenomedullin." Biochem.Biophys.Res.Commun.194. 720-725 (1993)
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[Publications] J.Sakata,et al.: "Molecular cloning and biological activities of rat adrenomedullin,a hypotensive peptide." Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 921-927 (1993)
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[Publications] Y.Ishiyama,et al.: "Hemodynamic effects of a novel hypotensive peptide,human adrenomedullin,in rats." Eur.J.Pharmacol.241. 271-273 (1993)
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[Publications] N.Minamino,et al.: "Distribution of C-type natriuretic peptide and its messenger RNA in rat central nervous system and peripheral tissue." Biochem.Biophys.Res.Commun.197. 326-335 (1993)
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[Publications] 井村裕天ら編(分担)寒川賢治他: "最新内科学大系17 内分泌疾患6 膵・消化管内分泌" 中山書店, 390(9) (1993)
