1992 Fiscal Year Annual Research Report

免疫応答と核へのシグナル

Research Project

Project/Area Number	04454621
Research Institution	Nagoya City University
Principal Investigator	中西守名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鳥越智香子名古屋市立大学, 薬学部, 助手 (70237163)
Keywords	カルシウムイオン / 共焦点レーザ顕微鏡 / 細胞内情報伝達 / サードメッセンジャー / 蛍光性分子ロータ / T細胞 / 好塩基球 / B細胞
Research Abstract	免疫応答と核へのシグナルを追究するため、本年度は、共焦点レーザ顕微鏡によるミリ秒レベルでの免疫応答のイメージングシステムの開発を行った。先ず、ヘリウム・カドミウムレーザを光源とする共焦点紫外レーザ顕微鏡により、細胞内カルシウムイオン動態のイメージングにおける種々の問題点を検討した。そして、indo-1を用いたカルシウムイオンの2波長蛍光画比の測定を可能にし、単一細胞でのカルシウムイオン濃度の共焦点画像の観察を行った。その結果、1)B細胞、T細胞、好塩基球等の抗原刺激に伴い、カルシウムシグナルが細胞質だけでなく核にまで伝達されること、2)抗原刺激後、カルシウムイオン濃度は細胞質よりも核でより大きく上昇することが明らかにした。一方、Hoechst33342とTMA-DPHを用いた核と細胞膜のイメジング技術を確立し、核へのカルシウムシグナルと細胞周期、ならびに、プログラム細胞死(アポトーシス)との関連をイメージング法により追究した。その結果、分裂期後期の好塩基球細胞においては、カルシウムシグナルが核に伝達しない事実を見いだした。また、アポトーシスに至る途中のT細胞や、未成熟B細胞においてもしばしば核へのカルシウムシグナルが伝達しないことも見いだした。また一方では、小胞体のカルシウムポンプの阻害剤であるタプシガルギンを用いた実験等からは、核のカルシウムシグナルは核膜中のカルシウムチャネルを通して、カルシウムイオンが細胞質から核に伝達されるものだと推察される結果を得た。さらに、新規蛍光試薬の開発にも取り組み、蛍光性分子ロータを用いた細胞骨格蛋白質の動態を追究する新技術を開発した。そして、免疫応答の初期過程での細胞膜から核へのインフォメーションフローの実体をイメージング法により追究する技法を考案し、免疫応答における核シグナルの実体を解明する新しいアプローチを確立した。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Yamada,H. Mizuguchi,J. Nakanishi,M.: "Single cell observation of ligand-induced desensitization of B-cell membrane immunoglobulin-mediated calcium signals" FEBS Lett.310. 201-203 (1992)
[Publications] Furuno,T. Isoda,R. Nakanishi,M.: "A fluorescence molecular rotor probes the kinetic process of degranulation of mast cells" Immunol.Lett.33. 285-288 (1992)
[Publications] Nakato,K. Furuno,T. Nakanishi,M.: "Cytosolic and internuclear calcium signals in rat basophilic leukemia cells as revealed by a confocal fluorescence microscope" Eur.J.Biochem.209. 745-749 (1992)
[Publications] Nagao,Y. Yamada,H. Nakanishi,M.: "Single cell observation of calcium signals in class II specific killer T cells" Immunol.Lett.34. 151-154 (1992)
[Publications] Furuno,T. Hamano,T. Nakanishi,M.: "Receptor-mediated calcium signal playing a nuclear third messenger in the activation of antigenspecific B cells" Biophysical J.(1993)
[Publications] 中西守: "抗原抗体反応の光制御" 免疫薬理. 10. 342-344 (1992)
[Publications] 中西守(分担): "細胞工学ハンドブック" 羊土社, 239 (1992)
[Publications] 中西守(分担): "現代免疫学のテクノロジー" 医学書院, (1993)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

免疫応答と核へのシグナル

Principal Investigator

中西 守 名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)

Research Products

[Publications] Yamada,H. Mizuguchi,J. Nakanishi,M.: "Single cell observation of ligand-induced desensitization of B-cell membrane immunoglobulin-mediated calcium signals" FEBS Lett.310. 201-203 (1992)

[Publications] Furuno,T. Isoda,R. Nakanishi,M.: "A fluorescence molecular rotor probes the kinetic process of degranulation of mast cells" Immunol.Lett.33. 285-288 (1992)

[Publications] Nakato,K. Furuno,T. Nakanishi,M.: "Cytosolic and internuclear calcium signals in rat basophilic leukemia cells as revealed by a confocal fluorescence microscope" Eur.J.Biochem.209. 745-749 (1992)

[Publications] Nagao,Y. Yamada,H. Nakanishi,M.: "Single cell observation of calcium signals in class II specific killer T cells" Immunol.Lett.34. 151-154 (1992)

[Publications] Furuno,T. Hamano,T. Nakanishi,M.: "Receptor-mediated calcium signal playing a nuclear third messenger in the activation of antigenspecific B cells" Biophysical J.(1993)

[Publications] 中西 守: "抗原抗体反応の光制御" 免疫薬理. 10. 342-344 (1992)

[Publications] 中西 守(分担): "細胞工学ハンドブック" 羊土社, 239 (1992)

[Publications] 中西 守(分担): "現代免疫学のテクノロジー" 医学書院, (1993)

中西守名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)

[Publications] 中西守: "抗原抗体反応の光制御" 免疫薬理. 10. 342-344 (1992)

[Publications] 中西守(分担): "細胞工学ハンドブック" 羊土社, 239 (1992)

[Publications] 中西守(分担): "現代免疫学のテクノロジー" 医学書院, (1993)