1993 Fiscal Year Annual Research Report
精密原子間距離測定を目的とした固体高分解能NMRシステムの開発
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04554017
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| Research Institution | Himeji Institute of Technology |
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Principal Investigator |
斉藤 肇 姫路工業大学, 理学部, 教授 (30100150)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 暁 姫路工業大学, 理学部, 助手 (60227387)
内藤 晶 姫路工業大学, 理学部, 助教授 (80172245)
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| Keywords | 回転共鳴法 / 回転エコー二重共鳴法 / 固体高分解能NMR / 双極子分裂 / 原子間距離測定 / NMR / REDOR / 三次元構造 |
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| Research Abstract |
回転共鳴法:回転共鳴からの原子間距離の算出と基礎となる測定試料として、^<13>C標識レチナールの調製と、測定の基礎となる化学シフトテンソルの異方性に関する情報を得るための実験を行い、タコロドプシンへの再構成実験の試みを行った。
回転エコー二重共鳴法(REDOR):手法解析の基準データとするべく、第一に小分子でかつ単純な系でもある^<13>C,^<15>N二重標識グリシンならびに、これをリガンドとしてカドミウム、亜鉛錯体を合成し結晶化を行った。^1H,^<13>C,^<15>N三重共鳴実験でそれぞれ^<13>C、^<15>N NMRのREDOR効果の評価から目的とするC-N原子間距離測定をおこなった。すでに測定データが存在するX線回折による値と比較して妥当な原子間距離に関する情報を得た。さらに、より一般的なタンパク質の三次元構造の解析法へと発展させるため、種々のアミノ酸残基を安定同位体で標識した生理活性ペプチドを合成し、上記の方法で求めた選択的な原子間距離情報をもとにした解析法として完成しつつある。
双極子分裂の直接観測:Gly-Pro-D-Leu-[^<15>N]Glyにおける末端残基における正確なN-H原子間距離を2次元局所双極子磁場分離NMR法により測定し、X線回折では測定が困難なその距離を1.01Aと正確に決定することができた。ここに得られた原子間距離とNH..O=C水素結合系における水素結合の強さとの相関を得るべく、関連したペプチドに関してすでにわれわれが得ている値と比較し、このような測定が水素結合系の研究に極めて有用であることを明かにすることができた。
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[Publications] A.Naito: "Determination of N-H Bond-lengths for Simple Peptides in the Solid State by Natural Abundance…" Bulletin of the Chemical Society of Japan. 66. 3309-3313 (1993)
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[Publications] S.Tuzi: "A High-resolution Solid-State ^<13>C NMR Study on 〔1-^<13>C〕 and 〔3-^<13>C〕 Ala and 〔1-^<13>C〕 Leu and…" European Journal of Biochemistry. 218. 837-844 (1993)
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[Publications] J.Aketagawa: "Activation of Limulus Coaguration Factor G by Several (1〓3)-B-D-Glucans : Comparsion of…" Journal of Biochemistry. 113. 563-566 (1993)
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[Publications] Y.Sugawara: "Reversible Crystal Transition of Guanosine between the Dihydrate and Anhydr〓〓s State…" Journal of Biological Structure and Dynamics. (印刷中).
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[Publications] 斉藤 肇: "固体高分解能NMRによる距離測定" 化学. 48. 220-221 (1993)
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[Publications] 斉藤 肇: "タンパク質の固体高分解能NMR" 生物物理. 33. 274-279 (1993)
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[Publications] A.Naito: "Peptide Chemistry 1993" Protein Research Foundation, 4 (1994)
