1993 Fiscal Year Annual Research Report

白血病における遺伝子診断法の開発と実用化

Research Project

Project/Area Number	04557133
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	平井久丸東京大学, 医学部(病), 講師 (90181130)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田中智之東京大学, 医学部(病), 医員花園豊東京大学, 医学部(病), 助手 (70251246) 三谷絹子東京大学, 医学部(病), 助手 (50251244)
Keywords	転座型白血病 / 慢性骨髄性白血病 / 急性転化 / t(3;21)転座 / AML1 / EVI-1キメラ遺伝子 / 転写因子
Research Abstract	我々は白血病における遺伝子診断法を開発し、それを実用化する目的で、慢性骨髄性白血病(CML)の急性転化時に出現する付加的染色体異常であるt(3;21)転座について解析を行った。 t(3;21)転座を分子生物学的に解析した結果、AML1/EVI-1キメラ遺伝子が形成され、これは融合mRNAへと転写されることが明らかになった。融合mRNAは8.2kbと7.0kbの主に2種類存在した。t(3;21)転座を有するヒト白血病細胞株SKH1より作成したcDNAライブラリーをスクリーニングし、全長と考えられる2つの約6kbのcDNAクローンを得た。これらのcDNAクローンは1つのopen reading frameを持ち、5'側に正常AML1シークエンス、3'側に第2エクソンからpoly(A)tail に至るEVI-1シークスエンを含んでいた。AML1およびEVI-1に対するポリクローナル抗体はSKH1細胞において同じ180kDのAML1/EVI-1融合蛋白質を認識した。この融合蛋白質はrunt homology domainを含むAML1のN端側とzinc finger typeの転写因子であるEVI-1の全長より構成されていた。このAML1/EVI-1 fusionの形成はRT-PCRで検討したt(3;21)転座を有する3症例で共通であった。さらに多くの症例を用いた解析が必要であるが、この結果はt(3;21)転座型白血病の遺伝子診断への臨床応用が可能であることを示している。AML1あるいはEVI-1の転写開始部位に位置する20-merのアンチセンスオリゴヌクレオチドはSKH1細胞における^3H-thymidineの取り込みを著明に抑制することから、AML1/EVI-1融合蛋白質はt(3;21)転座を有する白血病細胞の増殖に重要であると考えられた。以上の結果より、t(3;21)転座の結果新しいタイプのキメラ型転写因子が形成され、これがCML急性転化に関与している可能性が示唆された。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Toyoshima H: "Differently spliced cDNAs of human Itk receptor tyrosine kinase predict receptor proteins with and without tyrosine kinase domain and soluble receptor protein." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 5404-5408 (1993)
[Publications] Sugimoto K: "Mutations of the p53 gene in myelodysplastic syndromes and MDS-derived leukemia." Blood. 81. 3022-3026 (1993)
[Publications] Hanazono Y: "c-fps/fes protein-tyrosine kinase is implicated in a signaling pathway triggered by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin-3." EMBOJ.12. 1641-1646 (1993)
[Publications] Ogawa S: "Detection of the PML/RARα fusion gene in acute promyelocytic leukemia with a complex translocation involving chromosome 15,17,and 18." Cancer Genet.Cytogenet.69. 113-117 (1993)
[Publications] Amano M: "Rearrangement of retinoic acid receptor α and PML in promyelocytic blast crisis of Ph1 chromosome positive chronic myelocytic leukemia with normal copies of chromosome 15." Blood. 81. 2469-2470 (1993)
[Publications] Mitani K: "Generation of the AML1/Evi-1 fusion gene in the t(3;21)(q26;q22) causes blastic crisis in chronic myelocytic leukemia."

1993 Fiscal Year Annual Research Report

白血病における遺伝子診断法の開発と実用化

Principal Investigator

平井 久丸 東京大学, 医学部(病), 講師 (90181130)

Research Products

[Publications] Toyoshima H: "Differently spliced cDNAs of human Itk receptor tyrosine kinase predict receptor proteins with and without tyrosine kinase domain and soluble receptor protein." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 5404-5408 (1993)

[Publications] Sugimoto K: "Mutations of the p53 gene in myelodysplastic syndromes and MDS-derived leukemia." Blood. 81. 3022-3026 (1993)

[Publications] Hanazono Y: "c-fps/fes protein-tyrosine kinase is implicated in a signaling pathway triggered by granulocyte-macrophage colony-stimulating factor and interleukin-3." EMBOJ.12. 1641-1646 (1993)

[Publications] Ogawa S: "Detection of the PML/RARα fusion gene in acute promyelocytic leukemia with a complex translocation involving chromosome 15,17,and 18." Cancer Genet.Cytogenet.69. 113-117 (1993)

[Publications] Amano M: "Rearrangement of retinoic acid receptor α and PML in promyelocytic blast crisis of Ph1 chromosome positive chronic myelocytic leukemia with normal copies of chromosome 15." Blood. 81. 2469-2470 (1993)

[Publications] Mitani K: "Generation of the AML1/Evi-1 fusion gene in the t(3;21)(q26;q22) causes blastic crisis in chronic myelocytic leukemia."

平井久丸東京大学, 医学部(病), 講師 (90181130)