1992 Fiscal Year Annual Research Report

プロスタグランジンE受容体蛋白cDNAのクローニングと分子レベルでの活性化機構

Research Project

Project/Area Number	04670170
Research Institution	Osaka Bioscience Institute
Principal Investigator	伊藤誠二大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部, 副部長 (80201325)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木正昭名古屋大学化学測定機器センター, 助教授 (90093046) 坂本和一大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部, 研究員 (90235169)
Keywords	プロスタグランジンE_2 / 受容体 / クローニング / G蛋白 / 牛副腎髄質 / PCR
Research Abstract	牛TXA2受容体及びマウスEP3受容体の膜貫通領域部分のDNA配列をもとに牛副腎髄質、牛心臓、牛卵巣黄体などの組織のmRNAを鋳型にしたcDNAを用いてPCRを行った。その結果、TXA2受容体、EP3受容体と同じ配列をもつクローンがそれぞれ牛卵巣黄体、牛副腎髄質から数多く得られ、TXA2受容体、EP3受容体の発現に臓器特異性のあることが判明した。PCR法によりこれら受容体40-50%の相同性を有する未知のクローンがいくつか得られており、現在これらの解析を進めている。一方、鈴木はPGE_2受容体を同定するためにw鎖にアジドフェニール基を導入した光親和性PGE_2誘導体の合成を試みている。京都大学医学部、薬学部との共同研究で牛副腎髄質から得られたC末端の異なる4種類のEP3受容体を発現させたCHO細胞(102,105,106,112)を用いてCa_<2+>シグナルを調べた。4種類のクローンのうち105細胞ではPGE_2及びEP3受容体アゴニストM&B28767に反応して細胞内Ca_<2+>濃度を強い上昇、102細胞では弱い上昇がみられた。これらの細胞では、弱いながらイノシトールリン脂質代謝を亢進もみられた。牛副腎髄質の[^3H]PGE_2の特異的結合はM&B28767でほぼ完全に抑制されることから、牛副腎髄質におけるPGE_2のイノシトールリン脂質代謝回転はEP3受容体のサブタイプ105を介して行われることが示唆された。さらに、C末端の違いにより異なる情報伝達系とカップルするという興味深い知見が得られたが、これまで全く報告のない新しい知見で、この結果はおそらく異なるG蛋白、エフェクターを介するものと考えられる。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Ito S.et al.: "Type-1 and type-2 astrocytes are distinct targets for prostaglandins D_2,E_2,and F_<2α>." Glia. 6. 67-74 (1992)
[Publications] Minami T. et al.: "Allodynia evoked by intrathecal administration of prostaglandin F_<2α> to conscious mice." Pain. 50. 223-229 (1992)
[Publications] Suzuki M. et al.: "An azido-functionalized isocarbacyclin photoaffinity probe for a prostacyclin receptor." Tetrahedron. 48. 2635-2658 (1992)
[Publications] Ito S. et al.: "Identification of the prostacyclin receptor by use of [15-^3H_1]19-(3-azidophenyl)-20-norisocarbacyclin,an irreversible specific photoaffinity probe." J.Biol.Chem.267. 20326-20330 (1992)
[Publications] Negishi M. et al.: "Prostaglandin E_2-induced arachidonic acid release and catecholamine secretion from cultured bovine adrenal chromaffin cells." Biochem.Pharmacol.44. 2315-2321 (1992)
[Publications] Ito S. et al.: "Eicosanoids and other bioactive lipids in cancer,Inflammation and radiation injury" Kluwer Academic Publishers, 4 (1993)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

プロスタグランジンE受容体蛋白cDNAのクローニングと分子レベルでの活性化機構

Principal Investigator

伊藤 誠二 大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部, 副部長 (80201325)

Research Products

[Publications] Ito S.et al.: "Type-1 and type-2 astrocytes are distinct targets for prostaglandins D_2,E_2,and F_<2α>." Glia. 6. 67-74 (1992)

[Publications] Minami T. et al.: "Allodynia evoked by intrathecal administration of prostaglandin F_<2α> to conscious mice." Pain. 50. 223-229 (1992)

[Publications] Suzuki M. et al.: "An azido-functionalized isocarbacyclin photoaffinity probe for a prostacyclin receptor." Tetrahedron. 48. 2635-2658 (1992)

[Publications] Ito S. et al.: "Identification of the prostacyclin receptor by use of [15-^3H_1]19-(3-azidophenyl)-20-norisocarbacyclin,an irreversible specific photoaffinity probe." J.Biol.Chem.267. 20326-20330 (1992)

[Publications] Negishi M. et al.: "Prostaglandin E_2-induced arachidonic acid release and catecholamine secretion from cultured bovine adrenal chromaffin cells." Biochem.Pharmacol.44. 2315-2321 (1992)

[Publications] Ito S. et al.: "Eicosanoids and other bioactive lipids in cancer,Inflammation and radiation injury" Kluwer Academic Publishers, 4 (1993)

伊藤誠二大阪バイオサイエンス研究所, 第4研究部, 副部長 (80201325)