1993 Fiscal Year Annual Research Report
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04670265
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| Research Institution | The Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science |
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Principal Investigator |
三木 俊明 財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 炎症研究部門, 研究員 (10239204)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田ルシア 幸子 財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 炎症研究部門, 研究員 (20240327)
藤井 博匡 財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 炎症研究部門, 研究員 (70209013)
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| Keywords | 好中球 / 活性酸素 / CGD / 慢性肉芽腫症 / シトクロムb-558 / フラビン |
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| Research Abstract |
白血球(好中球などの食細胞)は、貪食に伴って急激に酸素を消費する。この消費した酸素はスーパーオキシド(O^-_2)に変えられて殺菌作用に利用される。このO^-_2生成系は細胞膜に局在する因子(b型ヘムとFAD)と細胞質因子(p47,p67,低分子G-蛋白質)で構成される。好中球を刺激すると、これらの細胞質因子が会合し、膜因子に結合してNADPHを基質としてO^-_2を生成し、膜外へ遊離する。我々は、この膜系の電子伝達因子の基礎研究(I)を行うと共に、O^-_2成系の異常症の研究(II)を行っていた。
I .この膜因子の中で重要な役割を担っているシトクロムb-558のヘム鉄の性質を明らかにするために、電子スピン共鳴(ESR)のシグナルを測定した。その結果、ミクロソームのシトクロムbとは異なるg値=3.2の特有な低スピン型ヘム鉄であることを明らかにした。一方、膜成分中、フラビンとしてFADが関与し、FMNは殆ど存在しないこと、細胞質因子はFAD蛋白質ではなく、活性化に関与する因子であることなどを明らかにした。
II.我々は、今日まで東京及び近県の国公立病院より、重症感染症患者の好中球機能検査を依頼され、かなりの高率で好中球のO^-_2生成異常症(慢性肉芽腫症,Chronic granulomatous disease:CGD)の患者を発見してきた。これらのCGD患者は、O^-_2生成機能欠損という同一の表現型でも、遺伝的には複数のタイプが存在する。現在遺伝子解析中である。
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[Publications] Yoshida,L.S.: "Determination of flavin contents in neutrophils by a sensitive chemiluminescence assay:Evidence for no translocation of flavoproteins from the cytosol to the membrane upon cell stimulation." Biochim.Biophys.Acta,. 1135. 245-252 (1992)
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[Publications] Miki,T.: "Reconstitution of superoxide-forming NADPH oxidase activity with cytochrome b-558 purified from porcine neutrophils-Requirement of a membrane-bound flavin enzyme for reconstitution of activity." J.Biol.Chem.267. 18695-18701 (1992)
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[Publications] Fujii,H.: "Electron paramagnetic resonance studies on cytochrome b-558 and peroxidases of pig blood granulocytes." Biochim.Biophys.Acta,. 1136. 239-246 (1992)
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[Publications] Miki,T.: "EPR signals of cytochrome b-558purified from porcine neutrophils." J.Biol.Chem.267. 19673-19675 (1992)
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[Publications] Yoshida L.S.: "Phosphatidylcholine peroxidation and liver cancer in mice fed a choline-deficient diet with ethionine." Free Radical Biol.Med.,. 14. 191-199 (1993)
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[Publications] Fujii H.: "In vivo studies of the metabolic fate of nitrosobenzene in the mouse." Mag.Reson.Med.31. 77-80 (1994)
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[Publications] Miki,T.: "Oxygen Radicals(Yagi,K.et.al.eds.)" Elsevier Science Pub., 47-50 (1992)
