1992 Fiscal Year Annual Research Report
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04670283
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
竹下 敏一 東北大学, 医学部, 助手 (60212023)
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| Keywords | IL-2受容体 / γサブユニット / 高親和性受容体 / インターナリゼーション / チロシレキナーゼ |
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| Research Abstract |
IL-2はT細胞を初め種々のリンパ球やマクロファージの増殖・分化因子であり、その作用は細胞表面のIL-2受容体に特異的に結合することにより発揮される。従って、IL-2作用機序を明らかにするには、IL-2受容体のサブユニット構造とそれらの機能を解析する必要がある。我々は、すでに、機能的なIL-2受容体には、従来から知られているα鎖・β鎖サブユニットに加え、第3のサブユニットγ鎖(p64)が付随していることを明らかにしてきた。本研究では、γ鎖の遺伝子を単離し、機能的IL-2受容体構築におけるγ鎖の役割を明らかにした。
β鎖を導入したヒトT細胞株、MOLTβを用い、IL-2存在下でβ鎖と共沈してくるγ鎖を二次元電気泳動で精製し、γ鎖のアミノ酸配列の一部を決めた。それをもとにPCR法でプローブを作製し、γ鎖cDNAを単離した。塩基配列が推測されるγ鎖蛋白は、シグナルペプチドと膜貫通領域を1つづつもち、成熟分子は347このアミノ酸よりなる。γ鎖はアミノ末端に4個のCysを持ち、膜貫通部位に近いところにTrp-Ser-x-Trp-SerからなるWXモチーフをもつ典型的なサイトカイン受容体スーパーファミリーに属す分子である。γ鎖の発現は血球系細胞に限局しており、線維芽細胞には発現していない。γ鎖を含むIL-2受容体サブユニット分子を線維芽細胞に導入する実験から、高親和性受容体はα・β・γ鎖のヘテロ三量体からなり、中親和性受容体はβ・γ鎖のヘテロ二量体であることが明らかとなった。IL-2のインターナリゼーション、IL-2刺激によるチロシン・キナーゼの活性化、核内転写因子の転写促進は高親和性・中親和性受容体により伝達され、γ鎖はβ鎖とともに機能的なIL-2受容体に必須の分子であることを明らかにした。
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[Publications] Takeshita,T.: "An associated molecule,p64,with IL-2receptor β chain:its possible involvement in formation of the functional IL-2 receptor complex." J.Immunol.148. 2154-2158 (1992)
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[Publications] Asao,H.: "IL-2-dependent in vivo and in vitro tyrosine phosphorylation of IL-2 receptor γ chain." FEBS letters. 304. 141-145 (1992)
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[Publications] Takeshita,T.: "Cloning of the γ chain of the human IL-2 receptor." Science. 257. 379-382 (1992)
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[Publications] Kumaki,S.: "Cell type-specific activation of a tyrosine kinase associated with IL-2 receptor β chain in response to IL-2." FEBS letters. 310. 22-26 (1992)
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[Publications] Asao,H.: "Reconstitution of the junctional IL-2 receptor complexes on fibroblastoid cells:Involvement of the cytoplasmic domain of the γ chain in two distinct signaling pathways." Natl.Acad.Sci.USA.
