1992 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗体が認識するDNA末端結合蛋白の生理活性と膠原病における病因的意義

Research Project

Project/Area Number	04670395
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	三森経世慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10157589)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大曽根康夫慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20160492) 浜信昭慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70228526)
Keywords	自己抗原 / 自己抗体 / 膠原病 / Ku抗原 / PCR / PCR-SSCP / 遺伝子多型性 / DNA末端結合蛋白
Research Abstract	【目的】我々は昨年度までに,膠原病患者に見いだされる抗Ku抗体が認識するDNA末端結合蛋白(Ku抗原)の80kDaサブユニット(p80)を規定する遺伝子に多型性があり,ある種の疾患と相関することを報告してきた.そこで本年度はKu抗原遺伝子のエピトープ領域の遺伝子構造および遺伝子多型を検討することを目的とした. 【方法】1)健常人および膠原病患者計30例の未梢血白血球よりDNAを抽出した.2)Ku抗原(p70/p80)のC末端に存在する抗原エピトープに相当するゲノムDNA領域(p70のアミノ酸545-609,p80のアミノ酸696-732)を,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)で増幅し,single strand conformation polymorphism(SSCP)によって症例間での塩基配列の相違を検討した.3)健常人3例,患者3例のPCR増幅DNAをM13ベクターにサブクローニングし,塩基配列を決定した. 【結果】1)p70およびp80のC末端エピトープ領域に相当する遺伝子は,PCR-SSCP法では1例を除き,健常人および膠原病患者ともに同一の電気泳動度を示し,塩基配列およびアミノ酸配列はすべて等しいものと考えられた.興味深いことに,色素性乾皮症の1例から得られたp70遺伝子のPCR産物は,他と異なる移動度を示した.2)PCR産物の塩基配列は,対象の6例間で有意の違いは認められなかった.しかし,p70をコードする2種類のDNAが対象のそれぞれから得られ,1つは既に報告されたp70の塩基配列と完全に一到したが,他方は数ヵ所の塩基が置換され,それに相当するアミノ酸配列に違いが認められた. 【結論】1)膠原病患者の自己抗原エピトープアミノ酸配列は健常人と差がなかった.2)p70は少なくとも2種類の遺伝子にコードされると考えられ,Ku抗原を規定する遺伝子ファミリーの存在が示唆された.

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] M.Hirakata, T.Mimori,et al: "Autoantibodies reactive with snRNP and scRNP in Japanese patients with polymyositis." Arthritis Rheum.35. 449-456 (1992)
[Publications] AJ. Griffith T.Mimori,et al: "Nucleotide sequence and genomic structure analysis of the p70 subunit of the human autoantigen." Molecular Biology Reports. 16. 91-97 (1992)
[Publications] Y.Ohosone T.Mimori,et al: "Autoantigenic epitopes of the B polypeptide of Sm small nuclear RNP particles." Arthritis Rheum.35. 960-966 (1992)
[Publications] T.Fujii, T.Mimori,et al: "Characterization of autoantibodies that react U4/U6 snRNP in sera from a patient with primary Sjogren's syndrome." J.Biol.Chem.267. 16412-16416 (1992)
[Publications] 諏訪昭,三森経世他: "リコンビナント自己抗原(Ku抗原)を用いた抗Ku抗体の検出" 日本臨床免疫学会雑誌. 15. 337-345 (1992)
[Publications] 三森経世: "抗核抗体研究の進歩ー自己抗体が認識する核および細胞質蛋白の構造と機能ー" リウマチ. 32. 366-387 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

自己抗体が認識するDNA末端結合蛋白の生理活性と膠原病における病因的意義

Principal Investigator

三森 経世 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10157589)

Research Products

[Publications] M.Hirakata, T.Mimori,et al: "Autoantibodies reactive with snRNP and scRNP in Japanese patients with polymyositis." Arthritis Rheum.35. 449-456 (1992)

[Publications] AJ. Griffith T.Mimori,et al: "Nucleotide sequence and genomic structure analysis of the p70 subunit of the human autoantigen." Molecular Biology Reports. 16. 91-97 (1992)

[Publications] Y.Ohosone T.Mimori,et al: "Autoantigenic epitopes of the B polypeptide of Sm small nuclear RNP particles." Arthritis Rheum.35. 960-966 (1992)

[Publications] T.Fujii, T.Mimori,et al: "Characterization of autoantibodies that react U4/U6 snRNP in sera from a patient with primary Sjogren's syndrome." J.Biol.Chem.267. 16412-16416 (1992)

[Publications] 諏訪 昭,三森 経世 他: "リコンビナント自己抗原(Ku抗原)を用いた抗Ku抗体の検出" 日本臨床免疫学会雑誌. 15. 337-345 (1992)

[Publications] 三森 経世: "抗核抗体研究の進歩 ー自己抗体が認識する核および細胞質蛋白の構造と機能ー" リウマチ. 32. 366-387 (1992)

三森経世慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10157589)

[Publications] 諏訪昭,三森経世他: "リコンビナント自己抗原(Ku抗原)を用いた抗Ku抗体の検出" 日本臨床免疫学会雑誌. 15. 337-345 (1992)

[Publications] 三森経世: "抗核抗体研究の進歩ー自己抗体が認識する核および細胞質蛋白の構造と機能ー" リウマチ. 32. 366-387 (1992)