小児ウイルス性脳炎の遺伝子診断に関する研究-早期診断への応用-

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04670589
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 森島 恒雄 名古屋大学, 医学部, 講師 (90157892)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 堀部 敬三 名古屋大学, 医学部, 講師 (30209308)
• Keywords: PCR / 単純ヘルペスウイルス / ウイルス性脳炎 / エンテロウイルス / 髄液 / 早期診断 / ウイルスDNA

Research Abstract

本年度はPolymerase Chain Reaction(PCR)法を単純ヘルペス脳炎(以下HSE)、エンテロウイルス髄膜脳炎に応用し、以下の結果を得た。
(1)HSEの早期診断にPCR法が非常に有用であることは前年度明らかにした。今年度は単純ヘルペスウイルス(HSV)DNAの髄液中の存在様式を検討し、成人および年長児のHSEではウイルスゲノムはフラグメントの形で少量存在するのに比べ、新生児のHSEではウイルス粒子として多量に存在することが明らかになった。
(2)髄液中のHSV DNAの定量を試み、急性期では髄液中で10^<3-7>copy/mlのゲノム量が検出され、その後抗ウイルス剤治療に伴い減少、消失していくことが判った。又、(1)の年長児と新生児の急性期比較では、後者の方がゲノム量も多かった。(10^2copy/mlvs10^4copy/ml)。
(3)エンテロウイルス5'-noncoding regionの共通配列内のプライマーに用いて、RT-PCR法にて各種エンテロウイルスの検出を試みたところ、polio1,2,3型、コクサッキーB1,2,6型およびコクサッキーA9,16などが増幅できるプライマーペアがみつかった。
(4)次年度は、1HSE診断のためのより簡便なPCR法の開発、2エンテロウイルスPCR法を実際の臨床診断に応用する、3髄液中の細胞障害性T細胞(CTL)クローンの樹立を試みる、予定である。

Research Products

• [Publications] Ando Y.et al.: "Quantitative analysis of herpes simplex virus DNA in cerebrospinal fluid of children with herpes simplex encephalitis." Journal of Medical Virology. 41. 170-173 (1993)
• [Publications] Kimura H.et al.: "T-cell receptor Vα region usage in the cerebrospinal fluid of patients with mumps meningitis." Journal of Medical Virology. 41. 306-311 (1993)
• [Publications] 森島 恒雄: "単純ヘルペスウイルス" 脳と発達. 25. 124-127 (1993)