炎症性サイトカインのInvitro及びInvivoでの発現機序の解析とその制御

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04671366
• Research Institution: Jichi Medical University
• Principal Investigator: 笠原 忠 自治医科大学, 医学部, 助教授 (60049096)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高 余洲 自治医科大学, 医学部, 助手 (30234686) ; 向田 直史 金沢大学, がん研, 助教授 (30182067)
• Keywords: 炎症性サイトカイン / 1L-6 / 1L-8 / MCAF(MCP-1) / ケモタキシス

Research Abstract

私どもは生体防御機構の解明をめざし感染や炎症の場における炎症性サイトカインの動態解析と遺伝子発現の制御の解析を目的としている。本年得られた成果は以下の通りである。
1.炎症性サイトカインの微量測定法の確立と種々の病態における動態解析:私どもはすでにIL-8,MCAFに対するモノクロナル抗体の作製とその免疫学的測定系の開発を行った(koら、1992)。この測定法を用いて、(1)110例に及ぶ尿路感染症患者尿中及び血清中でのIL-8の定量を行い、IL-8はIL-1やTMF-α量に比べ細菌・真菌感染と膿尿、白血球浸潤の程度とよく相関し、尿路感染症のよい指標となることを示した(koら、1993)。また、(2)妊婦羊水中で種々のサイトカイン産生を定量し、早期分娩とくに絨毛羊膜炎合併群でIL-6,G-CSF,IL-8が著しい高値を示すことを明らかにした。またこれらのサイトカインの産生部位を同定した(Saitoら、1993)。さらに、(3)免疫賊活剤(OK-432)投与した癌性胸膜炎癌者胸水中への炎症性サイトカインの同定を行った(Tsuchiyaら、投稿中)。
2.炎症性サイトカインのin vitroにおける遺伝子発現とその調節:私どもはIL-1,TNF-α及びLPSに反応してIL-8,MCAFなどの炎症性サイトカイン遺伝子が速やかにかつ高度に発現誘導される種々の培養細胞(ヒト線維芽細胞、グリオーマ、ヘパトーマなど)を用い、今回はとくにIL-8遺伝子発現に必要な5'上流部位の同定をCATアッセイ等によって行った(Mukaidaら、1992)。さらにグリオーマ細胞株においてグルココルチコイドによってIL-8遺伝子発現のダウン・レギュレーションが起きるが、これに必要な部位の同定を行った(Moritaら、投稿中)。
以上、今年度はin vitro及びin vivoにおけるIL-8の動態解析と遺伝子発現の調節機構の解析を中心に行ってきた。次年度はさらに、MCAFの生体防御における役割を中心に本課題を進展させてゆきたい。

Research Products

• [Publications] Ko,Y-C. Mukaida,N.Kasahara,T.et al.: "Establishment of a sensitive enzyme-linked immunosorbent assay for human 1L-8." J.lmmunol.Methods. 149. 227-235 (1992)
• [Publications] Mukaida,N. Gusella, G.,Kasahara,T.Ko, Y-C.,et al.: "Molecular analysis of the inhibition of 1L-8 production by dexamethasone in a human fibrosarcoma cell line." Immunology. 75. 674-679 (1992)
• [Publications] Ikeda,U.Ohkawa, F kasahara,T.et al.: "Serum interleukin 6 levels become elevated in acute myocardial infarction." J.Mol.Cell.Cardiol.24. 579-584 (1992)
• [Publications] Saito,S. Kasahara, T.,kato, Y.et al.: "Elevation of amniotic fluid interleukin-6 IL-8 and granulocyte-colony stimulating factor in term and preterm parturition." Cytokine. (1993)
• [Publications] Kikuchi, Y.Irie, M.Kasahara, T.et al.: "Induction of metallothionein in a human astrpcytoma cell line by interleukin-1 and heavy metals." FEBS Letters. (1993)
• [Publications] Ko,Y-C.MuKaida, N.Kasahara,T.et al.: "Elevated IL-8 level in the urine of patients with urinary tract infections." Infection Immunity. (1993)
• [Publications] Nielsen,B.W.Mukaida,N. Kasahara,T.Matsushima,K.: "“Macrophage-Pathogen Interactions"" Marcel-Dekker,(1993)
• [Publications] 笠原 忠(分担): "「サイトカインと疾病」(笠倉新平編)" 日本医学館, 6 (1992)