1993 Fiscal Year Annual Research Report
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04671393
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
永田 昭久 東京大学, 医学部(医), 講師 (50155933)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岡山 博人 東京大学, 医学部(医), 教授 (40111950)
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| Keywords | G2期細胞周期 / cdc25 / weel / キナーゼ |
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| Research Abstract |
分裂酵母の変異株を宿主とした異種生物間遺伝子相補クローニング法を用いて、動物細胞のG2期制御遺伝子の単離、解析を行なっている。本年度は、1)3種類のヒトcdc25遺伝子のうち、cdc25Aの解析、2)分裂酵母のweel/mik12重変異株を宿主として、HeLa細胞から作製したcDNAライブラリーのスクリーニングをおこなった。
1)ヒトcdc25Aは、cdc25BやCと異なりその発現がG1/S期で見られることから、この時期で機能している可能性が考えられる。そこで、同調培養したNRK細胞にcdc25Aの特異抗体を微量注入し、細胞がM期へ進入するか否かを調べた結果、ほとんどの細胞がM期へ進入していないことがわかった。次に、坑cdc25A抗体を注入した細胞が、細胞周期のどの時期で停止しているかをレーザー顕微鏡を用いたフローサイトメトリーで検討した結果、約76%の細胞がG1期で停止していることが判明した。
2)weel/mik12重変異株を相補する新たなヒト遺伝子W1-1を単離した。この遺伝子産物は分子量52KDのセリン/スレオニン型キナーゼで、その発現は、G2/M期で最高に達する。このキナーゼドメインのアミノ酸配列を他の蛋白質と比較すると、増殖の抑制制御に関与している出芽酵母のGCN2やインターフェロンで誘導されるpK68キナーゼと最も類似していた。W1-1キナーゼを分裂酵母内で、過剰発現させると、増殖抑制活性がみられることから、GCN2やpK68キナーゼと同様に、W1-1キナーゼは、増殖の抑制制御に関与している可能性が明らかとなった。
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[Publications] Honda Reiko: "De phosphorylation of human p34^<cdc2> kinase on both Thr-14 and Tyr-15 by human cdc25B phosphatase" FEBS Letter. 318. 331-334 (1993)
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[Publications] Tamura Kazuyoshi: "CyclinG:a new mamanalian cyclin with homology to fission yeast Cigl" Oncogene. 8. 2113-2118 (1993)
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[Publications] Jinno Shigeki: "Cdc25A is a novel phosphatase functioning early in the cell cycle" EMBO J. 6(in press). (1994)
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[Publications] 永田昭久: "細胞工学 vol12 NO.4" 秀潤社, 318 (1993)
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[Publications] 永田昭久: "蛋白質核酸酵素11" 共立出版, 96 (1993)
