アンチセンスDNA分子によるヒト白血病の遺伝子治療に関する基礎的研究

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04671531
• Research Institution: KYOTO PREFECTURAL UNIVERSITY OF MEDICINE
• Principal Investigator: 前川 平 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (80229286)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 村上 章 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 教授 (60210001)
• Keywords: アンチセンス / 白血病 / 分子標的治療

Research Abstract

1992年より文部省科学研究費補助金の援助を受け,白血病特異的な再構成あるいは増幅がん遺伝子に対するアンチセンスDNA分子(AS)により,その増殖抑制が可能であるかどうか検討し,平成5年度において以下のことを明らかにした。
1.慢性骨髄性白血病(CML)患者から得られた白血病細胞を,B3A2およびB2A2のmRNAに対するASと培養し,腫瘍細胞の増殖抑制を確認した(平成4,5年度)。
2.ASの配列特異的アンチセンス効果をCML細胞株BV173を用いて検討し,B3A2とB2A2 ASのあいだにcross resctivityがあることを明らかにした。配列上50%の相同性があること,PS ASは培養条件により標的としないmRNAを切断する可能性があることがcross reactivityの原因と考えられた。アンチセンス効果の発現には,標的mRNAの2次構造を考慮し,どの部位をターゲットにすればより効果的であるのか,どのような培養系や細胞側の条件が影響をおよぼすのかを解明する必要があると思われた(平成5年度)。
3.B2AB ASを添加すると,BV173細胞はアポトーシスを介して,その増殖が抑制されることが明らかとなった。さらに,BV173細胞質が抗c-ablモノクローナル抗体により染色されることを明らかにした。正常のc-abl蛋白は核に存在することから,BV173細胞では抗c-abl抗体はおもにBCR-ABLキメラ蛋白p210を認識しているものと考えられ,その蛍光強度がB2A2 ASにより減少することを確認した(平成5年度)。
4.現在,ほかの白血病にみられる再構成がん遺伝子に対するASを作製し,その効果を検討中である。また,白血病細胞BV173をマウスに移植し,ASの効果をin vivoで確認する基礎的実験に研究協力者と取り掛かり始めたところである。

Research Products

• [Publications] 前川 平: "アンチセンスDNA分子による白血病細胞の増殖抑制と分化誘導" BIOmedica. 8. 461-466 (1993)
• [Publications] Tamura,M.: "Reduction of the leukemagenic potential of malignant leukemic cells by in vivo treatment with recombinant Ruman gronulfcyte colony stimulating factor" Leukemia Research. 17. 593-600 (1993)
• [Publications] 前川 平: "LIFとオンコスタチンM" 臨床医. 19. 1896-1899 (1993)
• [Publications] Furukawa,T.: "Establishment of a new cell line with characteristies of a multi-potential progenitor from a patient with chronic myelogenous leukemie in early erythroblastic crisis" Leukemie. 8. 171-180 (1994)
• [Publications] 前川 平: "Antisenss oligornuclectideによる白血病細胞の増殖抑制" 血液・腫瘍科. 28. 64-77 (1994)
• [Publications] 前川 平: "癌と遺伝、臨床遺伝医学IV" 古庄敏行、清水信義、北川照男、武部 啓, 372 (1993)