1992 Fiscal Year Annual Research Report
原形質連絡においてウイルスの細胞間転移を促進する30Kタンパク質のリン酸化の解折
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04680260
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| Research Institution | Teikyo University |
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Principal Investigator |
渡辺 雄一郎 帝京大学, 理工学部, 助教授 (60183125)
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| Keywords | タバコモザイクウイルス / 植物ウイルス / リン酸化 / 細胞間移行 / 原形質連絡 / 30kDタンパク質 |
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| Research Abstract |
本研究では、タバコモザイクウイルス(TMV)を材料にしてウイルスと植物の相互作用を原形質連絡との関連で解析を行っている。TMVに限らず植物ウイルスが細胞間の移行をする場は原形質連絡である。そして細胞間移行する過程にはこのウイルスがコードする30kD蛋白質が機能している。実際、30kD蛋白質は原形質連絡に局在することも確認されている。植物のウイルス抵抗性応答を考える際にはある種のリン酸化酵素との相互作用が重要であることが明かとなってきた。 TMVの感染過程で30kD蛋白質が合成された後、リン酸化をうけていることが明かとなった。リン酸化を受けているアミノ酸は30kD蛋白質のアミノ酸残基234から261番目までに存在するセリンである可能性が示された。リン酸化を受けている30kD蛋白質を電気泳動後ゲルから回収し、トリプシン処理を施し、二次元展開することで解析を進めた。その結果、30kD蛋白質の中で3箇所においてリン酸化を受けていることが示唆された。site-directed mutagenesisなどの手法を用いて、リン酸化を受けるセリンの特定、リン酸化の機能への関与についての解析を更に進めている。並行して、大腸菌で発現させた30kD蛋白質を基質にして、無細胞系でのリン酸化活性の検索を行っている。通常の植物細胞の物質輸送、情報伝達が行われるこの原形質連絡に存在する蛋白質がリン酸化を受ける事実は通常の細胞の営みとの関連や、どのようなkinaseがリン酸化に関与しているのかなどを含めて興味が持たれる。
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[Publications] Meshi,T.,Hosokawa,D.,Kawagishi,M.,Watanabe,Y Okada,Y.: "Reinvestigation of intracellular localization of the 30K protein in tobacco protoplasts infected with tobacco mosaic virus RNA." Virology. 187. 809-813 (1992)
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[Publications] Ogawa,T.,Watanabe,Y.Okada,Y.: "Cis-acting elements for in trans complementation of replication-defective mutant of tobacco mosaic virus" Virology. 191. 454-458 (1992)
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[Publications] Watanabe,Y.,Ogawa,T.Okada,Y.: "In vivo phosphorylation of the 30-KDa protein of tobacco mosaic virus." FEBS Letters. 313. 181-184 (1992)
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[Publications] Tetsuo Meshi,Yuichiro Watanabe Yoshimi Okada: "Genetic Engineering with Plant Viruses" CRC Press,Boca Raton,Florida, 38 (1992)
