1992 Fiscal Year Annual Research Report
信号受容・調節モデルシステムの構築とそれを利用した光信号受容系の研究
Project/Area Number |
04680272
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Research Institution | Himeji Institute of Technology |
Principal Investigator |
岩佐 達郎 姫路工業大学, 理学部, 助教授 (00133926)
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Keywords | 信号受容 / 情報伝達 / モデルシステム / 視覚 / 光 / ロドプシン / G蛋白質 / アレスチン |
Research Abstract |
I: タコの眼由来のRNAからのG蛋白質遺伝子断片のクローニング。 研究計画の段階ではウシのトランスジューシンを用いる計画であったが、抽出したタコ・ロドプシンとは相互作用しなかったので、タコ由来のG蛋白質との相互作用を最初に検討することとした。そのために、タコ・G蛋白質の精製を分子生物学的な方法と蛋白質化学的な方法とで試みたが、まず、G蛋白質全長の60%以上を占める遺伝子断片のクローニングに成功した。得られた断片にはGi,Go,Gs類以の3種類の断片が含まれていた。今後、これらのG蛋白質遺伝子の全長のクローニング、及びその発現の局在、光情報伝達との関連を明らかにする必要がある(第30回生物物理学会報告)。また、種々のG蛋白質に特異的な抗体を用いてタコの光受容膜に存在するG蛋白質を検索している。 II: マダコ・ロドプシン遺伝子断片のクローニング。 マダコ・ロドプシンの遺伝子断片を得た。これを既に明らかになっていたミズダコ・ロドプシンの配列と比較すると非常に高い相同性を示した。現在まで生化学的な仕事にはミズダコが用いられてきたが、分子生物学的な仕事にはマダコの方が扱いやすい。今回の結果から、両者は極めて類縁性の高い種であることが明らかになったので、それぞれをうまく利用して、比較しつつ研究を進めて行けることが分かった。 III: タコ・ロドプシンのC末端側に存在するCysの特異的蛍光ラベルと光照射に伴なう蛍光強度変化の検出。 光照射に伴うロドプシンの構造変化を検出するためにタコ・ロドプシンの蛍光ラベルを試みていたが、C末端側にあるCys残基を特異的にラベルすることに成功した。さらに、光照射に伴いその蛍光強度が変化することを見いだした(第30回生物物理学会報告)。
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[Publications] Iwasa.T.: "Artificial Pigments of Halorhodopsin and Their Chloride Pumping Activities." Biochemistry. 31.1190-1195 (1992)
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[Publications] Iwasa,T.,Ito.M.Tokunaga,F.: "ANovel Bacteriorhodopsin Analogues with Conformationally 6-scis Fixed Retinals." Photochem.Photobiol.56.6.921-927 (1992)
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[Publications] Masuda,s.,Morita,E.H.Tasumi,M.,Iwasa,T.,Tsuda,M.: "Infrared Studies of Octopus Rhodopsin:Existence of a long-lived intermediate and the states of the carboxylic group of Asp-81 in rhodopsin and its photoproducts." FEBS Lett.in press.
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[Publications] Masuda,M.,Morita,E.H.Tasumi,M.,Iwasa,T.,Tsuda,M.: "Infrared Studies of Octopus Rhodopsin and Lumirhodopsin." J.Mol.Struct.in press.
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[Publications] Iwasa,T.,Abdulaev,N Tsuda,M.: "Cysteine residues in bovine rhodopsin in “Structures and Functions of Retinal Protiens"" John Libbey. Eurotext., (1992)
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[Publications] Tsuda,M.,Iwasa,T.,Nakagawa,M.,Kikkawa,S.,Tsuda,T.: "Regulation of signal coupling Proteins in octopus photoreceptors. in “11th International Congress on Photobiology;Excerpta Medica International Congress Series."" Elsevier Science Publisher., (1992)