1992 Fiscal Year Annual Research Report
培養骨膜細胞を用いた骨系統疾患の遺伝子異常の解明およびその治療
Project/Area Number |
04807105
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
中原 治彦 大阪大学, 医学部整形外科, 助手 (10198179)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小野 啓郎 大阪大学, 医学部整形外科, 教授 (70028330)
木村 友厚 大阪大学, 医学部整形外科, 講師 (80167379)
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Keywords | 骨膜細胞 / 骨 / 軟骨 / 分化 / サイトカイン |
Research Abstract |
骨の発生、成長過程において骨膜細胞は、膜骨化過程を終て直接骨芽細胞に分化するが、骨折治療、骨延長などの特殊な条件下では軟骨細胞にも分化する。このような骨膜細胞の有する分化能を評価するため、骨膜細胞をアガーゲル内で培養しclonal analysisすることにより、個々の骨膜細胞のクローンが骨・軟骨細胞の両者に分化能を有するのか、あるいは個々のクローンがすでにCommitmentを受けており別個に骨芽細胞、軟骨細胞に分化するかを検討した。この結果、(1)この培養条件下で骨及び軟骨のコロニーがそれぞれ1.5%,1.95%出現すること、(2)TGFβ1は0.1〜1.0ng/mlの濃度において軟骨コロニーの出現率を増加させ(3.35%)、そのタイムコースを早める(至適濃度0.5ng/ml)、また、骨コロニーの出現率を低下させることが明らかとなった。以上から骨膜細胞のcell populationの中にはすでに軟骨あるいは骨細胞に分化するcommitmentを受けた細胞群が存在すること、及びTGFβ1は軟骨細胞前駆細胞の増殖と分化を促進することが明らかとなった。 また骨膜細胞の高密度培養系において、ヒトリコンビナントBMP-2、TGFβ1の作用を検討した結果、BMP-2は、骨形成の促進、軟骨の肥大石灰化に促進的に作用し、TGFβ1は軟骨形成を促進し骨形成を抑制することが明らかとなった。以上のようにアガーゲルによるclonalな解析、あるいは高密度培養系を用いることにより骨膜細胞が骨軟骨細胞へ分化する過程における種々のサイトカイン、成長因子の作用が明らかになりつつある。
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[Publications] Iwasaki,M.,Nakata,K.,Nakahara,H.,Nakase,T.,Kimura,T.,Kimata,K.A.I.Caplan Ono,K.: "Transforming Growth Factor-β_1 Stimulates Chondrogenesis and Inlabits Osteogenesis in High Density Culture of Periosteum-Derived Cells." Endocrinology. 132. (1993)
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[Publications] Iwasaki,M.,Nakata,K.,Nakahara,H.,Nakase,T.,Kimura,T.,Ono,K.: "Transforming Growth Factor-β_1 Stimulates Chondrogenesis in Culture of Periosteal Cells." The 3rd.Conference of The International Society for Fracture Pepair(IsFR-92). 25-26
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[Publications] Nakase,T.,Iwasaki,M.,Kimura,T.,Nakata,K.,A.I.Caplan Kimata,K.,Nakahara,H.: "Clonal Analysis for Developmental Potential of Chick Periosteum-Derived Cells-Agar Gel Cultuse System-" Transactions of the 39th Annual Meeting Orthopaedic Research Society 抄録集. 485-
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[Publications] Iwasaki,M.,Nakase,T.,Nakahara,H.,Takaoka,K.,A.I.Caplan.,Ono,K.: "Bone Morphogenetic Protein-2 Stimulates Osteogenesis in High Density Culture of Periosteum-Derived Cells" Transactions of the 39th Annual Meeting Orthopaedic Research Society 抄録集. 483-
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[Publications] 中原 治彦,Arnold.I.Caplan Victor.M.Goldberg: "培養ヒト骨膜細胞の骨膜骨形成能について多孔性セラミックとの複合移植" 第12回整形外科セラミック・インプラント研究会抄録集.