アタキシア・テランジェクタシアを用いたヒト放射線感受性遺伝子の単離と解析

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04808032
• Research Institution: KYOTO UNIVERSITY
• Principal Investigator: 江島 洋介 京都大学, 放射線生物研究センター, 助教授 (50127057)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐々木 正夫 京都大学, 放射線生物研究センター, 教授 (20013857)
• Keywords: AT / 放射線感受性 / ヒト遺伝病 / 放射線ハイブリド / IRS-PCR

Research Abstract

放射線高感受性を特徴とするヒト遺伝病のAT(アタキシア・テランジェクタシア)を用い、ヒト放射線感受性遺伝子を単離することを目的として研究をおこない以下の成果を得た。
1.ATの原因遺伝子が座位するヒト染色体11q23領域に切断点をもつX/11転座染色体を用いて、11q23領域の微小ヒト断片をもつ放射線ハイブリドを作成した。クローンRH12/1はAT細胞の放射線高感受性を相補するが他の2クローン(MH12/1,MH12/3)は相補せず、両者の差異領域に遺伝子が存在するという作業仮説を設定して以後の解析をすすめた。
2.11q23領域内のDNAマーカーの存否を調べたところ、3クローンとも調べた11マーカー中D11S144とD11S351の2マーカーのみを保持しており、RH12/1に固有の既知のマーカーはなかった。これは11番染色体上のRH12/1に固有の領域がきわめて微小であることを示す。注目されるのは、リンケージ解析からAT遺伝子にもっとも接近するとされるD11S384をも欠いていることであり、遺伝子がD11384よりテロメア側DRD2〜D11S351領域内にあるという新しい可能性を示唆する。
3.RH12/1からsCos1をベクターに用いてコスミドライブラリーを作成した。50万個のクローンから256個のヒト由来のクローンを分離し、21個の11番染色体由来クローンを同定したが、この中にはAT遺伝子を含むものはなかった。一方RH12/1からのIRS-PCR産物のなかから単離したプラスミドpBM8.9は11番染色体上のRH12/1に固有の領域内にあり、AT遺伝子にきわめて近接する可能性が高い。このマーカーをもとにAT遺伝子を探索してゆきたい。

Research Products

• [Publications] M.V.Kato: "Parental Origin of germ-line and somatic mutations in the retinoblastoma gene" Human Genetics. 94. 31-38 (1994)
• [Publications] K.Ishizaki: "Increased UV-induced SCEs but normal repair of DNA damage in p53-deficient mouse cells" Int.J.Cancer. 58. 254-257 (1994)
• [Publications] Y.Ejima: "Ataxia-telangiectasia" Springer-Verlag(R.A.Gatti and R.B.Painter Eds.), 283 (1993)