1993 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
04836011
|
Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
Principal Investigator |
淺野 仁子 京都大学, 医療技術短期大学部, 教授 (10028392)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
淺野 朗 大阪大学, 蛋白質研究所, 教授 (30029938)
|
Keywords | ミトコンドリアDNA / 加齢 / LINE / 制限食 / 自由食 / 心筋 / 大脳 / 小脳 |
Research Abstract |
今年度は引き続き、ミトコンドリアDNA(mtDNA)と核DNA(nDNA)の量比の加齢に伴う変動をラットの各組織を対象に行った。測定をより正確に行うため、内部標準としてnDNAに存在する高度繰り返し配列“LINE"を用いる事とした。LINE配列のうち、制限酵素SalIとPstIで切り出される2kbpの断片に対応するプローブを合成しビオチン化した(プローブN)。ラットの種々の組織からの精製DNAをEcoRI,SalIとPstIで消化したものをサザンブロットし、mtDNAのプローブとプローブNを同時に加えてハイブリッドさせる。このようにするとビオチン化プローブの発色の程度は、mtDNAとnDNAに対するものが同時に測定できる程度なので、この発色強度の比をmtDNA/nDNAの値とした。mtDNAプローブの方はLINEの2kbpと分離の良いEcoRIのA断片(6.2kbp)に対応するプローブを用いることにした。 心筋では、前年度までに24ヶ月齢で減少が認められていたが、30ヶ月齢も測定した。その結果、肝と同様に30ヶ月齢では2ヶ月齢の30%以下となっていた。また、これまでの実験は餌を60%に制限したラット群の値であったが、自由食の群と比較し、餌の効果を調べた。その結果、肝臓では制限食の場合と同様にmtDNA/nDNAの量比は加齢と共に減少した。心筋では、この比の減少は少なくなった。腎臓では逆に、制限食の時は減少せず、自由食の方は減少傾向を示した。さらに、自由食ラットの脳についてmtDNA/nDNAの量比を測定した結果では、大脳では減少が認められたが、小脳を含む部分では減少しなかった。
|
-
[Publications] K Asano,M Nakamura,T Sato,& A Asano: "Age dependency of Mitochondrial DNA decrease differs in different tissues of rat" Jour.of Biochemistry. 114. 303-306 (1993)
-
[Publications] T Yoshimi,N Mimura,S Aimoto,& A Asano: "Transitional Expression of Neural Cell Adhesion Molecule Isoforms During Chicken Embryonic Myogenesis" Cell Structure and Function. 18. 1-11 (1993)
-
[Publications] I Suetake,S Tajima,& A Asano: "Identification of two novel mouse nuclear proteins that bind selectively to a methylated c-Myc recoginzing sequence" Nucleic Acid Research. 21. 2125-2130 (1993)
-
[Publications] K Imai,M Nakamura,A Asano et al.: "A novel transcript from a pseudogene for human glucocere-brosidase in non-Gaucher disease cells" Gene. 136. 365-368 (1993)
-
[Publications] K Ichikawa,N Mimura,& A Asano: "Brefeldin A inhibits muscle-specific gene expression during differentiation in C2C12 myoblasts" Experimental Cell Research. 209. 333-341 (1993)
-
[Publications] 淺野 仁子: "ミトコンドリアと老化" Molecular Medicine. 30. 1140-1147 (1993)